[VIP第1年] 指数:3
70%酒精2.实验步骤(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)(2)取约(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀(3)65℃水浴3-10min，广东进口RNA合成仪厂商,期间混匀2-3次(4)加入等体积的酚(注意是酸酚):氯仿:异戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm，广东进口RNA合成仪厂商,4℃,5min)(5)取上清,等体积的氯仿:异戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5min)(6)加入1/4V体积10MLiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)(7)10，广东进口RNA合成仪厂商,000rpm,4℃离心20min(8)弃上清,用500ulSSTE溶解沉淀(9)酚:氯仿:异戊醇(25:24:1)抽提两次,氯仿:异戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上(11)12,000rpm,4℃离心20min(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥(13)加200ul的DEPC处理水溶解(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)注意：提取RNA请尽量在低温下操作,如果条件不容许。
加入2/3倍体积的-20℃预冷异丙醇,混匀,静置约30min6.用毛细玻棒挑出絮状沉淀,用75%乙醇反复漂洗数次,再用无水乙醇漂洗1次,吹干,重悬于500ulTE中7.加入1ulRNaseA(10mg/mL),37℃处理1h8.用酚():氯仿:异戊醇(25:24:1)和氯仿:异戊醇(24:1)各抽提1次(10,000rpm,4℃离心5min)9.取上清,1/10V3MNaAc,℃沉淀30min以上10.沉淀用75%乙醇漂洗,风干,溶于200ulTE中,-20℃保存备用DNA提取缓冲液:100mMTris-HCl(),20mMEDTA(),NaCl,2%CTAB(W/V),4%PVP40(W/V)和2%巯基乙醇(V/V),PVP和巯基乙醇使用前加入5MKAc方法一和二,是大同小异.主要是DNA提取液配方不一样！成本也不一样！三、菌丝的总RNA的提取1.实验试剂(1)RNA提取缓冲液(CTAB):2%CTAB(W/V),2%聚乙烯吡咯烷酮PVP(W/V),100mMTris-HCl(),25mMEDTA,亚精胺Spermidine,NaCl,2%巯基乙醇(V/V,使用前加入).由于在高温灭菌条件下,Tris-HCl要和DEPC发生反应,所以配RNA提取缓冲液时直接用DEPC处理的水配制即可(2)SSTE:1MNaCl,SDS(W/V),10mMTris-HClEDTA(3)10MLiCl直接用蒸馏水配10MLiCl,加1‰的DEPC过夜后,高温灭菌(4)3MNaAc(5)氯仿:异戊醇(24:1)(6)酚():氯仿:异戊醇(25:24:1)(7)DEPC处理水用1‰的DEPC处理蒸馏水过夜,高温灭菌(8)无水乙醇。
到目前为止工业生产、电力生产、食品安全生产、化工生产、医疗制药行业、电子设备生产等行业为磁力架主要且***的应用范围。将去料斗，进料槽，地板空处的铁杂质除去是磁力架的主要用途，其可以将小颗粒中的铁杂质以及自由流动的粉末有效地除去。外形美观的磁棒合理地分布于磁力架上，**度的磁场为其所提供，以便将流动物料中的铁粉末，铁屑，和其他带磁性小片金属吸引住。优势容易安装：能够非常简单且快速地进行安装。通过特殊的生产制造工艺能够将其制作出来。能够组合固定，使得磁性过滤架构成，也能够在生产线上任意可以与物料接触的位置按照，安装的时候也相当容易。在使用过程中，磁力架以纯物理磁场为依靠依靠，产品在整个物理磁场过程中不会有二次污染产生，因此，在直接接触任何物料的任意部位均能够安装磁力棒，其它清洁产品不能够媲美他的环保优势。在生产过程中，磁力架的设计能够根据生产环境和作用部位来进行，其有着非常灵活多变的外型，能够使得空间优势发挥到比较大。磁场强度高：磁力架有很高的磁场强度，有着***快速的分离过程。30s为磁磁分离的平均时间，多根高性能22mm磁力棒将其组合而成，产品经久耐用，小巧轻盈。
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