一、按照不同用途,DNA合成仪可分为实验室型,工业型和大规模合成三种主要类型。1,实验室型:主要指合成通量较小,天津好RNA合成仪服务商,且单柱合成产物为10-1000nmol的DNA合成仪,一般为合成柱数低于48柱(含)的DNA合成仪,主要适用于化学生物学实验室,或某些刚起步的商业机构。该类型DNA合成仪品牌较多,包括已停产的ABI391,394,3400,3900,BECKMANoligo-1000,及仍然量产的polygen10柱,12柱,mermade4,6,8,12,48柱;BIOSSETASM-800,AZCOOLIGO-8等,天津好RNA合成仪服务商。2,工业型工业型合成仪,主要指合成通量大,且单柱合成产物为10-1000nmol的DNA合成仪。工业型合成仪常见的合成柱数为96柱,天津好RNA合成仪服务商、192柱,384柱或更多合成柱数的合成仪较为鲜见。主要适用于大型实验室,公用实验平台及商业合成机构。国内主要的商业合成机构如上海生工,北京赛百盛,上海捷瑞,华大基因,金斯特,金维斯等。该类型DNA合成仪较实验室型品牌相对较少,常见的品牌有美国biolytic,丹麦oligomaker,美国mermade,美国polyplex等。在欧洲,polygen96柱合成工作站及384柱合成塔也是较常见的工业型合成仪之一。3,大规模合成型大规模合成型主要指单柱合成产物量可达数克,甚至数公斤的合成仪,主要用于原料药制备等科研或商业用途。
用还原性断裂法把多肽同高聚物分离,再用色层法提纯。固相法的建立和应用**地促进了多肽合成研究。多肽合成方法分类多肽的合成主要分为两条途径:化学合成多肽和生物合成多肽。化学合成主要是以氨基酸与氨基酸之间缩合的形式来进行。在合成含有特定顺序的多肽时,由于多肽合成原料中含有官能度大于2的氨基酸单体,多肽合成时应将不需要反应的基团暂时保护起来,方可进行成肽反应,这样保证了多肽合成目标产物的定向性。多肽的化学合成又分为液相合成和固相合成。多肽液相合成主要分为逐步合成和片段组合两种策略。逐步合成简洁迅速,可用于各种生物活性多肽片段的合成。片段组合法主要包括天然化学连接和施陶丁格连接。近年,多肽液相片段合成法发展迅速,在多肽和蛋白质合成领域已取得了重大突破。在多肽片段合成法中,根据多肽片段的化学特定性或化学选择性,多肽片段能够自发进行连接,得到目标多肽。因为多肽片段含有的氨基酸残基相对较少,所以纯度较高,且易于纯化。1963年,美国***生物化学家Merrifield提出了固相合成法,开展了多肽固相合成,即将氨基酸的C末端(羧基端)连接在不溶树脂上,然后在此树脂上依次进行氨基酸的缩合、延长肽链。
对流速的细微变化,以自动调节每个柱子的输送次数来补偿。每一个5—端口柱阀块将流出物导入废液口、DMT收集口,或DNA收集瓶,它也控制用于除去或冲洗柱内和柱阀块内的试剂的氩气。辅助真空对于阀块的适当运行,关键是隔膜形成一个圆顶小空隙,每次电磁阀打开时,抽气泵为每个阀块提供了辅助真空,辅助真空在隔膜的螺线管一侧形成,使隔膜形成一圆顶空隙。合成柱起始结合在载体(一般为CPG)上的核苷酸是装在一次性的柱子中,除柱体外,还有2个固定过滤板和2个接头,所有的部件都由惰性材料制成。固定过滤板是多孑L性聚苯乙烯固定在两端盖子中。入口和出口都是母路厄氏(1uer)接头,与仪器的公路厄氏接头配对。柱子是对称的(没有顶端和底部、前后之分),可以以任何方式与公路厄氏接头相连接。每一个柱子都用颜色编号,表示不同的起始核苷酸,以及有一个***的连续顺序号码。正常的流路是从底部进入,通过向上输送液体,使CPG颗粒上升并保持悬浮状态。溶剂和试剂的流速已经设置好,能使颗粒适当地混合。路节流阀试剂通过底部的luer接头,流到柱子,如果没拧上下面的一个luer接头,应会在一个圆柱形的玻璃流路节流阀上发现。试剂通过流路节流阀中一个很小的通道流到柱子。
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