展开全部一、按照不同用途,DNA合成仪可分为实验室型,工业型和大规模合成三种主要类型。1,实验室型:主要指合成通量较小,且单柱合成产物为10-1000nmol的DNA合成仪,一般为合成柱数低于48柱(含)的DNA合成仪,主要适用于化学生物学实验室,或某些刚起步的商业机构。该类型DNA合成仪品牌较多,包括已停产的ABI391,394,3400,3900,BECKMANoligo-1000,及仍然量产的polygen10柱,12柱,mermade4,6,8,12,48柱;BIOSSETASM-800,AZCOOLIGO-8等。2,工业型工业型合成仪,主要指合成通量大,且单柱合成产物为10-1000nmol的DNA合成仪。工业型合成仪常见的合成柱数为96柱、192柱,384柱或更多合成柱数的合成仪较为鲜见。主要适用于大型实验室,公用实验平台及商业合成机构。国内主要的商业合成机构如上海生工,北京赛百盛,上海捷瑞,华大基因,北京好RNA合成仪代理,金斯特,金维斯等。该类型DNA合成仪较实验室型品牌相对较少,常见的品牌有美国biolytic,丹麦oligomaker,美国mermade,北京好RNA合成仪代理,北京好RNA合成仪代理,美国polyplex等。在欧洲,polygen96柱合成工作站及384柱合成塔也是较常见的工业型合成仪之一。3,大规模合成型大规模合成型主要指单柱合成产物量可达数克,甚至数公斤的合成仪,主要用于原料药制备等科研或商业用途。
分子杂交仪又被叫做分子杂交箱或者分子杂交炉。由于实验的需求不一样,因此有不同规格型号的分子杂交仪可供选择。它是现代实验室采用杂交技术的理想设备,能够将塑料杂交袋和水浴摇床替代掉,从而使杂交袋破损带来的污染危险得以避免。杂交炉的特点分别为较快的升温速度,独特的炉内空气循环装置设计以及精确的微机控温。原理按照碱基互补配对原则,使用标记的已知DNA或RN**段(探针)在一定条件下对样本中是否有待测的核酸序列进行检测的技术,即为核酸分子杂交技术。在生理条件下,DNA呈现稳定的双链螺旋结构。在体外,当存在如温度超过65℃、含胺或极端pH等变性因素时,DNA分子内部的氢键断裂,解离成两条单链DNA,这种现象叫做变性。在将变性因素消除以后,单链DNA通过碱基互补使稳定的双链螺旋结构重新结合成,该过程叫做复性或退火。在复性过程中,如果有和样本核酸某部分序列高度同源或相同的寡核苷酸(一般为17~45个碱基)或外源性单链DNA片段,那么两者能够通过互补碱基使杂交体形成,也就是双链DNA分子,该过程叫做杂交。在复性的DNA中加入一段已知的DNA片段,如果有双链分子结合成,那么表明有已知的DNA序列存在于样本中。
琥珀酰亚胺丙酸酯-SPA,N-羟基琥珀酰亚胺-NHS,丙酸基-CH2CH2COOH,醛基-CHO(如丙醛-ALD,丁醛-butyrALD),丙烯酸基(-Acrylate)-ACRL,叠氮基-Azide,生物素基-Biotin,荧光素基-Fluorescein,戊二酸基-GA,酰肼基-Hydrazide,炔基-Alkyne,对甲苯磺酸酯基-OTs,琥珀酰亚胺琥珀酸酯-SS等。带有羧酸的PEG衍生物可以与N末端的胺或者赖氨酸侧链进行偶联。氨基活化的PEG可以与门冬氨酸或者谷氨酸侧链偶联。MAL活化的PEG可以与完全脱保护的半胱氨酸侧链的硫醇进行偶联[11]。PEG修饰剂常见分类如下(注:mPEG即methoxy-PEG,CH3O-(CH2CH2O)n-CH2CH2-OH):(1)直链PEG修饰剂mPEG-SC,mPEG-SCM,mPEG-SPA,mPEG-OTs,mPEG,mPEG-ALD,mPEG-butyrALD,mPEG-SS(2)双官能团PEG修饰剂HCOO-PEG-COOH,NH2-PEG-NH2,OH-PEG-COOH,OH-PEG-NH2,HCl·NH2-PEG-COOH,MAL-PEG-NHS(3)分枝形PEG修饰剂(mPEG)2-NHS,(mPEG)2-ALD,(mPEG)2-NH2,(mPEG)2-MAL8、生物素化生物素可以与亲和素或者链霉亲和素有力结合,结合强度甚至接近共价键。生物素标记的肽通常用于免疫测定,**细胞化学和基于荧光的流式细胞术。标记的抗生物素抗体也可以用来结合生物素化多肽。生物素标记常连接在赖氨酸侧链或者N末端。
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