DNA结合蛋白中有一种专门与单链DNA结合的类型,称为单链DNA结合蛋白。人类的复制蛋白A是此类蛋白中获得较多研究的成员,作用于多数与解开双螺旋有关的过程,包括DNA复制、重组以及DNA修复。这类结合蛋白可固定单链DNA,北京寡核苷酸合成仪哪个牌子好,使其变得较为稳定,以避免形成茎环(stem-loop),或是因为核酸酶的作用而水解。相对而言,其他的蛋白质则只能与特定的DNA序列进行专一性结合。大多数关于此类蛋白质的研究集中于各种可调控转录作用的转录因子。这类蛋白质中的每一种,都能与特定的DNA序列结合,进而活化或抑zhi位于启动子附近序列的基因转录作用。转录因子有两种作用方式,第yi种可以直接或经由其他中介蛋白质的作用,而与负责转录的RNA聚合酶结合,北京寡核苷酸合成仪哪个牌子好,再使聚合酶与启动子结合,并开启转录作用。第二种则与专门修饰组zhi蛋白的酵素结合于启动子上,使DNA模板与聚合酶发生接触的难度改变。由于目标DNA可能散布在生物体中的整个基因组中,北京寡核苷酸合成仪哪个牌子好,因此改变一种转录因子的活性可能会影响许多基因的运作。这些转录因子也因此经常成为信号传递过程中的作用目标,也就是作为细胞反映环境改变,或是进行分化和发育时的媒介。具专一性的转录因子会与DNA发生交互作用,使DNA碱基的周围产生许多接触点。
在于组成糖分子的不同,DNA为2-脱氧核糖,RNA则为核糖。DNA的双螺旋通过在两条链上存在的含氮碱基之间建立的氢键来稳定。组成DNA的四种碱基是腺嘌呤(A)、胞嘧啶(C)、鸟嘌呤(G)和胸腺嘧啶(T)。所有四种碱基都具有杂环结构,但结构上腺嘌呤和鸟嘌呤是嘌呤的衍生物,称为嘌呤碱基,而胞嘧啶和胸腺嘧啶与嘧啶有关,称为嘧啶碱基。两条核苷酸链沿着中心轴以相反方向相互缠绕在一起,很像一座螺旋形的楼梯,两侧扶手是两条多核苷酸链的糖一磷基因交替结合的骨架,而踏板就是碱基。DAN双螺旋是右旋螺旋。不同磷酸盐基团之间的凹槽仍然暴露在外。主沟宽,而小沟宽。两个凹槽的不同宽度决定了蛋白质对不同碱基的可接触性,这取决于碱基是在主沟还是小沟中。与DNA的蛋白质,如转录因子,通常与处在大沟中的碱基接触。脱氧核糖核酸理化性质编辑DNA是高分子聚合物,其溶液为高分子溶液,具有很高的粘度,可被甲基绿染成绿色。DNA对紫外线(260nm)有吸收作用,利用这一特性,可以对DNA进行含量测定。当核酸变性时,吸光度升高,称为增色效应;当变性核酸重新复性时,吸光度又会恢复到原来的水平。较高温度、有机溶剂、酸碱试剂、尿素、酰胺等都可以引起DNA分子变性。
1977年,荧光标记的抗体被应用于识别特异性DNA—RNA杂交II。1980年,。[2]荧光原位杂交技术原理编辑荧光原位杂交技术技术原理是将荧光素直接或间接标记的核酸探针[或生物素、地高辛、dinitrophenyl(I)NP)、aminoacetylAAFfluorine(AAF)等标记的核酸探针与待测样本中的核酸序列按照碱基互补配对的原则进行杂交,经洗涤后直接在荧光显微镜下观察。[2]荧光原位杂交技术是一种重要的非放射性原位杂交技术,原理是利用报告分子(如生物素、地高辛等)标记核酸探针,然后将探针与染色体或DNA纤维切片上的靶DNA杂交,若两者同源互补,即可形成靶DNA与核酸探针的杂交体。此时可利用该报告分子与荧光素标记的特异亲和素之间的免疫化学反应,经荧光检测体系在镜下对待DNA进行定性、定量或相对定位分析。[1]荧光原位杂交技术优点编辑与其他原位杂交技术相比,荧光原位杂交具有很多优点,主要体现在:①F不需要放射性同位素标记,更经济安全。②F的实验周期短,探针稳定性高,特异性好,定位准确,能迅速得到结果。③F通过多次免疫化学反应,使杂交信号增强,灵敏度提高,其灵敏度与放射性探针相当。④多色F通过在同一个核中显示不同的颜色可同时检测多种序列。
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