[VIP第1年] 指数:3
利用寡核苷酸自动合成仪，可很简单地合成制备寡核苷酸探针（如15～50bp），类探针具有以下优点：①短的探针比长探针杂交速度快，特异性强。②可以在短时间内大量制备。③在合成中进行标记制成探针。④可合成单链探针，避免了用双链DNA探针在杂交中自我复性，提高杂交效率。⑤寡核苷酸探针可以检测小DNA片段，在严格的杂交条件下，可用于检测在序列中单碱基对的错配。因此，寡核苷酸探针的研究，对于提高核酸杂交技术的特异性和敏感性，扩大应用范围有重要意义。常用的寡核苷酸探针有3种：①特定序列的单一寡核苷酸探针；②较短的简并性较高的成套寡核苷酸探针；③较长而简并性较低的成套寡核苷酸探针。多用32P标记寡核苷酸探针，如：1）通过T4噬菌体多核苷酸激酶催化的磷酸化反应标记合成的寡核苷酸探针，在合成寡核苷酸时期5’端缺少一个磷酸基，因而易用T4噬菌体多核苷酸激酶进行磷酸化反应，而将α-32P从[γ-32P]ATP转移至其5’端。这种磷酸化反应**多能使每一寡核苷酸分子中掺入一个32P原子，上海寡核苷酸合成仪哪个牌子好。2）用大肠杆菌DNA聚合酶iKlenow片段标记合成的寡核苷酸探针，上海寡核苷酸合成仪哪个牌子好，上海寡核苷酸合成仪哪个牌子好，其比活性更高，每一寡核苷酸分子可带有若干个放射性原子，放射性比活度可高达2×1010计数/（min·mg）。
DNA结合蛋白中有一种专门与单链DNA结合的类型，称为单链DNA结合蛋白。人类的复制蛋白A是此类蛋白中获得较多研究的成员，作用于多数与解开双螺旋有关的过程，包括DNA复制、重组以及DNA修复。这类结合蛋白可固定单链DNA，使其变得较为稳定，以避免形成茎环（stem-loop），或是因为核酸酶的作用而水解。相对而言，其他的蛋白质则只能与特定的DNA序列进行专一性结合。大多数关于此类蛋白质的研究集中于各种可调控转录作用的转录因子。这类蛋白质中的每一种，都能与特定的DNA序列结合，进而活化或抑zhi位于启动子附近序列的基因转录作用。转录因子有两种作用方式，第yi种可以直接或经由其他中介蛋白质的作用，而与负责转录的RNA聚合酶结合，再使聚合酶与启动子结合，并开启转录作用。第二种则与专门修饰组zhi蛋白的酵素结合于启动子上，使DNA模板与聚合酶发生接触的难度改变。由于目标DNA可能散布在生物体中的整个基因组中，因此改变一种转录因子的活性可能会影响许多基因的运作。这些转录因子也因此经常成为信号传递过程中的作用目标，也就是作为细胞反映环境改变，或是进行分化和发育时的媒介。具专一性的转录因子会与DNA发生交互作用，使DNA碱基的周围产生许多接触点。
寡核苷酸，是一类只有20个以下碱基的短链核苷酸的总称（包括脱氧核糖核酸DNA或核糖核酸RNA内的核苷酸），寡核苷酸可以很容易地和它们的互补对连结，所以常用来作为探针确定DNA或RNA的结构，经常用于基因芯片、电泳、荧光原位杂交等过程中。中文名寡聚核苷酸外文名oligonucleotideDNA类型短链核苷酸的总称作用作为探针确定DNA或RNA的结构应用基因芯片、电泳、荧光原位目录1核苷酸2调控寡核苷酸3定点诱变技术寡聚核苷酸核苷酸编辑寡核苷酸合成的DNA（脱氧核糖核酸）可以用于链聚合反应，能扩增确定几乎所有DNA的片段，在这个过程中寡核苷酸是作为引物，和DNA中标的的互补片段结合，作成DNA的复制品。寡聚核苷酸调控寡核苷酸编辑调控寡核苷酸用于抑zhiRN**段，防止其翻译成蛋白，在制止ai细胞活动方面能起一定的作用。寡聚核苷酸定点诱变技术编辑是由加拿大的生物化学家M·史密斯（MichaelSmith，1932—）发明的。其基本原理如下：应用寡聚核苷酸进行DNA的定点诱变时，首先要把含有待突变的DN**断段克隆到MI3噬菌体载体中，MI3噬菌体的正链可以感ran具有纤毛的细菌，并在细菌体内进行复制后，以出芽的形式形成新的带有正链DNA的噬菌体。
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