[VIP第1年] 指数:3
二、按试剂碱基添加方式分类，DNA合成仪可分为电磁阀气动驱动，蠕动泵驱动两种类型。1，电磁阀气动驱动型：采用高于大气压的惰性气体（氩气，氮气或氦气）为碱基试剂溶液的驱动方式，通过微量电磁阀的开合添加试剂或碱基溶液。主要品牌包括ABI系列合成仪，oligomaker系列合成仪，biolytic系列合成仪，GE系列合成仪及mermade系列DNA合成仪等。2，采用蠕动泵驱动型：采用精密蠕动泵为碱基试剂溶液的驱动方式，通过蠕动泵驱动，滑块的相互滑动选择添加不同碱基试剂溶液。主要品牌包括德国POLYGEN系列DNA合成仪。三、按产物承载容器分，可分为需要一次性合成柱，天津操作性能好基因合成仪，无需一次性合成仪两类。除德国polygen系列合成仪外，天津操作性能好基因合成仪，其它所有品牌合成仪，天津操作性能好基因合成仪，如，oligomaker，mermade，ASM,POLYPLEX,ABI等都使用一次性合成柱作为合成产物的承载容器。
DNA的固相合成。即DNA3'端固定于基质上，然后沿3'向5'方向依此添加核苷酸直至合成所需的DNA片段。不同于应用DNA聚合酶的DNA合成。合成过程第yi个碱基的3‘末端固定在树脂上，下一个碱基的5’-OH用二对甲氧三苯甲基DMT保护，碱基上的氨基用苯甲酸保护，然后对3‘-OH用氨基磷酸化合物进行活化。’-OH和下个碱基的3‘-OH形成亚磷酸三酯，2.然后用碘氧化成磷酸三酯3.加入二氯乙酸除去第二个碱基5’-OH上的保护剂DMT循环进行加入下一个碱基合成完毕后1。用苯硫酚除去5’-OH上的保护剂DMT2。用浓氢氧化铵将片段与固体树脂断开，洗脱3。用浓氢氧化铵在加热的条件下除去碱基上的保护剂4。除去氢氧化铵，真空抽干5。液相色谱或者PAGE，回收片段**长的。
13)如果分部收集器用来收集每个DMT脱保护步骤的流出物，确保试管充分清洁干净，并打开分部收集器，确保DMT废液管路通向分部收集器。14)启动循环，运行开始程序清洗试剂管路，除去原来的试剂。注意：TritylOnAuto表示在合成寡核苷酸的5’端核苷酸带有一个DMT，并将其从固相载体上切下来，储存在收集瓶中；TritylOffAuto表示在合成寡核苷酸的5，端核苷酸没有保护基团，将其从固相载体上切下来，储存在收集瓶中；TritylOnManual表示合成寡核苷酸的5’端核苷酸带有一个DMT，寡核苷酸没有从固相载体上切下来，而是保留在合成柱中；TritylOffManual表示在合成寡核苷酸的5，端核苷酸没有保护基团，寡核苷酸没有从固相载体上切下来，而是保留在合成柱中。DNA合成仪日常维护编辑1．瓶塞“O”形环一月检查一次“O”形环，**少1年更换1次。将新的备用“O”形环与仪器上的相比较，如果在“O”形环上出现白色沉淀，用棉花蘸取乙腈，进行清洗。更换“O”形环的步骤如下：用止血钳夹住“O”形环，从槽中取下(或用牙签钩下)，注意不要损坏托住“O”形环的白色聚氟乙烯插塞(tefloninsert)；确保插塞上没有颗粒后，用手指将新“O”形环推进槽，进行压力实验。
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