[VIP第1年] 指数:3
寡核苷酸探针的非放射性标记时，可用以下几种方法：1．酶延伸法合成与探针目的基因的3’-端一段互补的寡核苷核序列，此序列的5’-端多加一个A，与目的基因片段退火，再用Klenow酶延伸，使bio–dUTP掺入探针的3’末端。2．5’磷酸末端标记法带5’-磷酸的寡核苷酸探针，在咪唑缓冲液中用水溶性碳二亚胺（EDC）处理，可生成活性的磷酸咪唑中间体，与过量的乙二胺作用，就可以引入一个带氨基的接臂。用活化生物素标记就可以得到5’-磷酸标记的寡核苷酸探针。3．酶标探针法用双功能联接剂如辛二酸双羟基琥珀亚胺酯联接寡核苷酸和碱磷酶，可以生成1：1的酶标寡核苷酸探针。此法省略了生物素-亲合素中间步骤，可减少非特异性反应，江苏销售寡核苷酸合成仪代理。4．生物素酰肼胞嘧啶修饰法在亚liusuan盐催化下，江苏销售寡核苷酸合成仪代理，生物素酰肼可置换寡核苷酸探针中胞嘧啶上的氨基而得生物素化寡核苷酸探针。5．寡核苷酸的酶促加尾标记法在末端转移酶的作用下，用非放射性物质修饰的核苷酸（生物素dATP；生物素-dUTP；地高辛-dUTP）可加到DNA的3’末端，每个探针DNA可加上10～20个修饰碱基。（1）取，江苏销售寡核苷酸合成仪代理，插入冰浴中，加入寡核苷酸（3pmol）×μl，5×加尾缓冲液20μl，dUTP4μl（终浓度200μmol/L），修饰的dNTP（生物素-dUTP。
主要用途编辑包括：1）临床诊断方面。用于研究人类多基因相关性疾病（如ai症、心血管疾病等），发现相关的基因及其相互作用机理，寻找早期发现，早期诊断的方法；同时还可制成外源性bing原体相关基因芯片，如病du性肝炎芯片等；2）基因功能研究。应用基因芯片可以开展DNA测序、基因表达检测、基因突变性、基因功能研究、寻找新基因、单核苷酸多态性（SNP）测定等研究；3）药wu筛选和新药开发。采用了基因芯片技术来寻找药wu靶标，查检药wu的毒性或副作用，用芯片作大规模的筛选研究可以省略大量的动物试验，缩短药wu筛选所用时间，在基因组药学（pharmacogenomics）领域带动新药的研究和开发；并可指导实现合理用药。4）环境监测和指导高科技农业等。监测流行病和传染病扩散；监测有害微生物的发生和传播；农、林、牧、渔等产业的品种改良和病虫防治。5）其它。如DNA身份认定等。
而且间期细胞核所显示出的扩增DNA荧光信号的数量多少及荧光强度常与DNA扩增的水平有关。F被广泛应用于乳腺*、膀胱*，宫颈*，肺*和淋巴*等实体**的辅助诊断。乳腺*细胞中Her-2/neu基因的扩增常预示着患者预后较差，25%~30%的乳腺*患者有Her-2/neu基因的扩增和/或过度表达。应用Her-2/neu基因DNA探针检测Her-2/neu基因的扩增表达水平，有利于对乳腺*进行临床诊断及疗效监测。使用染色体着丝粒特异性探针可以对间期细胞进行染色体数量变异分析，如Hopman采用F技术研究膀胱*，发现9号染色体的丢失。采用多种染色体探针，以不同的颜色标记，可用于**染色体数目改变的异质性研究。目前，F主要集中用于对**的早期诊断、疗效检测，个体化***和预后判断等方面。
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