琥珀酰亚胺丙酸酯-SPA,N-羟基琥珀酰亚胺-NHS,丙酸基-CH2CH2COOH,醛基-CHO(如丙醛-ALD,丁醛-butyrALD),丙烯酸基(-Acrylate)-ACRL,叠氮基-Azide,生物素基-Biotin,荧光素基-Fluorescein,戊二酸基-GA,酰肼基-Hydrazide,炔基-Alkyne,对甲苯磺酸酯基-OTs,琥珀酰亚胺琥珀酸酯-SS等。带有羧酸的PEG衍生物可以与N末端的胺或者赖氨酸侧链进行偶联。氨基活化的PEG可以与门冬氨酸或者谷氨酸侧链偶联。MAL活化的PEG可以与完全脱保护的半胱氨酸侧链的硫醇进行偶联[11]。PEG修饰剂常见分类如下(注:mPEG即methoxy-PEG,CH3O-(CH2CH2O)n-CH2CH2-OH):(1)直链PEG修饰剂mPEG-SC,mPEG-SCM,北京好RNA合成仪品牌企业,mPEG-SPA,mPEG-OTs,mPEG,mPEG-ALD,mPEG-butyrALD,mPEG-SS(2)双官能团PEG修饰剂HCOO-PEG-COOH,NH2-PEG-NH2,北京好RNA合成仪品牌企业,OH-PEG-COOH,OH-PEG-NH2,HCl·NH2-PEG-COOH,北京好RNA合成仪品牌企业,MAL-PEG-NHS(3)分枝形PEG修饰剂(mPEG)2-NHS,(mPEG)2-ALD,(mPEG)2-NH2,(mPEG)2-MAL8、生物素化生物素可以与亲和素或者链霉亲和素有力结合,结合强度甚至接近共价键。生物素标记的肽通常用于免疫测定,**细胞化学和基于荧光的流式细胞术。标记的抗生物素抗体也可以用来结合生物素化多肽。生物素标记常连接在赖氨酸侧链或者N末端。
用还原性断裂法把多肽同高聚物分离,再用色层法提纯。固相法的建立和应用**地促进了多肽合成研究。多肽合成方法分类多肽的合成主要分为两条途径:化学合成多肽和生物合成多肽。化学合成主要是以氨基酸与氨基酸之间缩合的形式来进行。在合成含有特定顺序的多肽时,由于多肽合成原料中含有官能度大于2的氨基酸单体,多肽合成时应将不需要反应的基团暂时保护起来,方可进行成肽反应,这样保证了多肽合成目标产物的定向性。多肽的化学合成又分为液相合成和固相合成。多肽液相合成主要分为逐步合成和片段组合两种策略。逐步合成简洁迅速,可用于各种生物活性多肽片段的合成。片段组合法主要包括天然化学连接和施陶丁格连接。近年,多肽液相片段合成法发展迅速,在多肽和蛋白质合成领域已取得了重大突破。在多肽片段合成法中,根据多肽片段的化学特定性或化学选择性,多肽片段能够自发进行连接,得到目标多肽。因为多肽片段含有的氨基酸残基相对较少,所以纯度较高,且易于纯化。1963年,美国***生物化学家Merrifield提出了固相合成法,开展了多肽固相合成,即将氨基酸的C末端(羧基端)连接在不溶树脂上,然后在此树脂上依次进行氨基酸的缩合、延长肽链。
化学发光免疫分析仪***用于**标志物、***等免疫类项目的检测,采用独有的磁性微粒子技术、超灵敏度光电倍增管及稳定的放大系统,具有高灵敏度、高稳定性、高准确性的特点。化学发光免疫分析仪工作原理化学发光免疫分析仪以磁性微粒子为载体,以碱性磷酸酶为标记物,采用夹心法或竞争结合法,以发光底物AMPPD为基础进行免疫检测。化学发光免疫分析仪的工作流程:主探针吸取标本、试剂和磁性微粒并注入RV(反应)管中。稀释混合后的RV管被传送入孵育带进行孵育,以加速抗原与抗体的结合,并**终形成固相包被(即抗体-抗原-酶标抗体复合体),接着RV管被送入清洗转盘洗涤2~3次,此期间磁性微粒包被在电磁场的作用下被吸附在RV管一侧以进行清洗,其未结合多余成分被吸出并排走。清洗好后,由基质液泵和基质液阀吸入发光底物AMPPD,并分配到RV管中,再次孵育以加强信号,此期间磁性粒子表面的碱性磷酸酶在催化作用下产生处于激发态的间氧苯甲酸甲酯阴离子,当该阴离子回到基态时会产生470nm的光,并被光电管检测而**终产生结果。化学发光免疫分析仪的结构1、转盘模块化学发光免疫分析仪转盘模块包括试剂盘、样本盘、样本架及各类附属监测部件。
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