DNA结合蛋白中有一种专门与单链DNA结合的类型,称为单链DNA结合蛋白。人类的复制蛋白A是此类蛋白中获得较多研究的成员,作用于多数与解开双螺旋有关的过程,包括DNA复制、重组以及DNA修复。这类结合蛋白可固定单链DNA,使其变得较为稳定,以避免形成茎环(stem-loop),或是因为核酸酶的作用而水解。相对而言,其他的蛋白质则只能与特定的DNA序列进行专一性结合。大多数关于此类蛋白质的研究集中于各种可调控转录作用的转录因子。这类蛋白质中的每一种,都能与特定的DNA序列结合,进而活化或抑zhi位于启动子附近序列的基因转录作用。转录因子有两种作用方式,第yi种可以直接或经由其他中介蛋白质的作用,而与负责转录的RNA聚合酶结合,再使聚合酶与启动子结合,海南优良寡核苷酸合成仪哪家好,并开启转录作用。第二种则与专门修饰组zhi蛋白的酵素结合于启动子上,使DNA模板与聚合酶发生接触的难度改变。由于目标DNA可能散布在生物体中的整个基因组中,海南优良寡核苷酸合成仪哪家好,因此改变一种转录因子的活性可能会影响许多基因的运作,海南优良寡核苷酸合成仪哪家好。这些转录因子也因此经常成为信号传递过程中的作用目标,也就是作为细胞反映环境改变,或是进行分化和发育时的媒介。具专一性的转录因子会与DNA发生交互作用,使DNA碱基的周围产生许多接触点。
确定DNA链在染色体上的精细位置适用于检在某些特殊的染色休易位和缺失。标记同一-DNA链与不同种属细胞的染色体杂交,可以找出不同种属之间的同源基因以及基因在染色体上的位置,从而了解种属之间的进化关系。(二)染色体数目与结构异常在细胞遗传学检在中,重复序列的探针应用**多,包括a卫星DNA探针、β卫星DNA探针和经典卫星DNA(elassic-stlliteDNA)探针。a卫星DNA探针主要检测人染色体的着丝粒。β卫星DNA探针位于顶端着丝粒染色体及染色体的异染色质周围。经典卫星DNA探针有AATCG短片段重复,位于染色体1、9、15、16和Y染色体长臂异染色质周围。后2种探针除可用于染色体数目检查外,还可用于上述部位精细改变的检查。应用F技术检测染色体数目与结构异常,具有较高的特异性及敏感性,目前已被广泛应用于快速产前诊断。(三)血液**学临床上对血液**的F检测主要集中在:染色体异位形成的融合基因的检测,如ber/abl易位DNA探针、t(15;17)易位DNA探针和t(18;21)易位DNA探针等;基因缺失检测可以发现一些关键基因的缺失,有助于疾病的诊断及预后判断;使用荧光原位杂交技术可对微小残留病灶进行检测,以及进行造血干细胞移植状态的监测。。
而且间期细胞核所显示出的扩增DNA荧光信号的数量多少及荧光强度常与DNA扩增的水平有关。F被广泛应用于乳腺*、膀胱*,宫颈*,肺*和淋巴*等实体**的辅助诊断。乳腺*细胞中Her-2/neu基因的扩增常预示着患者预后较差,25%~30%的乳腺*患者有Her-2/neu基因的扩增和/或过度表达。应用Her-2/neu基因DNA探针检测Her-2/neu基因的扩增表达水平,有利于对乳腺*进行临床诊断及疗效监测。使用染色体着丝粒特异性探针可以对间期细胞进行染色体数量变异分析,如Hopman采用F技术研究膀胱*,发现9号染色体的丢失。采用多种染色体探针,以不同的颜色标记,可用于**染色体数目改变的异质性研究。目前,F主要集中用于对**的早期诊断、疗效检测,个体化***和预后判断等方面。
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