血清培养基主要问题:血清含一些对细胞产生毒性的物质,如多胺氧化酶,能与来自高度繁殖细胞的多胺反应(如精胺、亚精胺)形成有细胞毒性作用的聚精胺。补体、抗体、细菌有毒的等都会影响细胞生长,阜新培养基制备器销售,甚至造成细胞死亡。动物个体不同,阜新培养基制备器销售,血清产地、批号不同,阜新培养基制备器销售,每批质量差异甚大,其成分不能保持一致。取材中可能带入支原体、病毒,对细胞产生潜在影响,可能导致实验失败或实验结果不可靠性。大规模生产中,血清来源越来越困难,价格昂贵,是构成动物细胞培养对生产成本的主要部分之一。培养基通常采用高压蒸汽灭菌。阜新培养基制备器销售
简单制作培养基,需要完成以下几个主要步骤:需要对其进行消毒处理,普通介质使用121℃高压蒸汽灭菌15分钟。本发明适用于各种介质的制备,如无特殊要求,可用于灭菌。一些热成分,如碳水化合物,应该单独制备20%或更多的浓缩液,过滤或间断杀菌,然后通过无菌操作技术加入到培养液中。在低温下,明胶培养基也能杀菌。血、体液及素应经无菌处理后,加至约50℃冷却培养基中。需要对培养基的质量进行检测。每次处理完培养基,都要仔细检查,如破损、浸渍、颜色异常、棉塞污染等,要进行筛选和弃置,才能确定 pH值。培养基培养一晚,若有细菌生长,培养基将被丢弃。常规菌株接种1×2管或瓶培养基,24 h培养,对生长不良或无菌的菌株进行培养,追踪其产生原因,并反复接种。如不发生变化,应丢弃培养基,禁止使用。呼和浩特培养基制备器批发厂家培养基可以选择使用水浴模式预先溶解。
简单制作培养基,需要完成以下几个主要步骤:需要选择培养基配方,同一种培养基,其表达方式往往存在着差异。所以,除了应当严格按照标准方法的规定编制之外,我们一般应尽可能收集有关数据,加以比较和核对,然后根据自己的目的选择和记录数据来源。需记录培养基的制备,培养基的制备记录包括培养基的名称、配方及其来源、pH值、灭菌温度、时间、配制日期、制备人等,并且要复印记录和保存原始记录备查。对副本的记录应该和培养基一起保存,以防出现混乱。需称重培养基的成分,培养基成分要准确称量,并注意防止混淆。每一种成分称量完毕后,都要在分装的一面打上记号,然后将分装的药物一起放在左边。每一个成分称量完之后,都会向右移动。全部称量完毕,应再次检查。
牛肉膏蛋白胨液体培养基(又称营养肉汤,用于培养细菌):成分:牛肉膏3g、蛋白胨10g、NaCl5g,蒸馏水(或去离子水)1000mL,pH7.4士0.2。制法:将各成分溶解于水中,于20~25℃条件下以1mol/LNaOH溶液用pH计校正pH7.4,分装三角瓶(装量以三角瓶容积的1/2~2/3为宜),或试管(分装量以试管高度的1/4左右为宜),0.1MPa灭菌15~20min后备用。化学分类:天然培养基指一类利用动、植物或微生物体包括其提取物制成的培养基。如牛肉膏蛋白胨培养基、麦芽汁培养基等。组合培养基又称为合成培养基或综合培养基,是一类按微生物的营养要求精确设计后用多种高纯化学试剂配制成的培养基。如葡萄糖铵盐培养基、淀粉硝酸盐培养基等。半组合培养基指一类主要以化学试剂配制,同时还加有某种或某些天然成分的培养基。例如,马铃薯蔗糖培养基。为防止冷凝水过多,也可将培养基冷却至45 ~ 50°C再倒平板。
培养基配制:配制用水,培养基的大部分是水,所以水的质量直接影响培养基的质量。按Waymouth标准,水的电阻应为200万欧姆,一般实验室里以玻璃蒸馏器制备的双蒸水或三蒸水可以符合使用条件。培养基:培养基有天然、人工两种。一般实验室使用的是RPMI-1640粉末培养基,以双蒸或三蒸水配制。NaHCO3(或HCl)调pH至7.2-7.4,若pH值超过7.6或远低于6.8,则大多数细胞不能生长。RPMI-1640不耐高压灭菌,使用前需经灭菌0.22μm孔径滤膜滤过处理。血清:培养中常使用小牛血清(或胎牛血清)。血清亦不能高压灭菌,无菌的小牛血清需在56℃水浴30分钟灭活补体,置4℃冰箱存放待用。配制时含量视培养细胞种类、时间而定,一般用10—15%。由于血清成分复杂、条件不易控制,可选用无血清培养基。有时需要在培养基中加入消泡沫剂以减少泡沫的产生,或适当提高灭菌温度。温州培养基制备器供应商
制备培养基的操作要点:液体培养基所配制的培养基是液态的。阜新培养基制备器销售
培养基配置原则:控制氧化还原电位不同类型微生物生长对氧化还原电位(F)的要求不一样,一般好氧性微生物在F值为+0.1V以上时可正常生长,一般以+0.3—+0.4V为宜,厌氧性微生物只能在F值低于+0.1V条件下生长,兼性厌氧微生物在F值为+0.1V以上时进行好氧呼吸,在+0.1V以下时进行发酵。F值与氧分压和pH有关,也受某些微生物代谢产物的影响。在pH相对稳定的条件下,可通过增加通气量(如振荡培养、搅拌)提高培养基的氧分压,或加入氧化剂,从而增加F值;在培养基中加入抗坏血酸、硫化氢、半胱氨酸、谷胱甘肽、二硫苏糖醇等还原性物质可降低F值。阜新培养基制备器销售
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