[VIP第1年] 指数:3
天然培养基是指一类利用动物、植物或微生物体包括其提取物制成的培养基。例如。牛肉膏蛋白胨培养基、麦芽汁培养基和LB培养基等。常用的天然有机营养物质包括豆芽汁、玉米粉、土壤浸液、麸皮、牛奶、血清、椰子汁等。天然培养基成本较低，除在实验室经常使用外，也适于用来进行工业上大规模的微生物发酵生产。组合培养基合成培养基是根据天然培养基的成分，用化学物质模拟合成、人工设计而配制的培养基。例如，高氏1号培养基和查氏培养基等。合成培养基有一定的配方，包头培养基制备器厂家，配制合成培养基时重复性强，包头培养基制备器厂家，包头培养基制备器厂家，但与天然培养基相比其成本较高，微生物在其中生长速度较慢，一般适于在实验室用来进行有关微生物营养需求、代谢、分类鉴定、生物量测定、菌种选育及遗传分析等方面的研究工作。半组合培养基指一类主要以化学试剂配制，同时还加有某种或某些天然成分的培养基。培养基长时间的高温灭菌会使某些不耐热的物质破坏，如使糖类物质形成氨基糖、焦糖。包头培养基制备器厂家
培养基配制：配制用水，培养基的大部分是水，所以水的质量直接影响培养基的质量。按Waymouth标准，水的电阻应为200万欧姆，一般实验室里以玻璃蒸馏器制备的双蒸水或三蒸水可以符合使用条件。培养基：培养基有天然、人工两种。一般实验室使用的是RPMI-1640粉末培养基，以双蒸或三蒸水配制。NaHCO3（或HCl）调pH至7.2-7.4，若pH值超过7.6或远低于6.8，则大多数细胞不能生长。RPMI-1640不耐高压灭菌，使用前需经灭菌0.22μm孔径滤膜滤过处理。血清：培养中常使用小牛血清（或胎牛血清）。血清亦不能高压灭菌，无菌的小牛血清需在56℃水浴30分钟灭活补体，置4℃冰箱存放待用。配制时含量视培养细胞种类、时间而定，一般用10—15%。由于血清成分复杂、条件不易控制，可选用无血清培养基。温州培养基制备器牛肉浸液中加入适量的蛋白胨、氯化钠、磷酸盐，调节 pH7.2～7.6，经灭菌处理后，即为基础液体培养基。
培养基配置原则：控制pH条件，当培养基中酸性物质积累导致H+浓度增加时，H+与弱碱性盐结合形成弱酸性化合物，培养基pH不会过度降低；如果培养基中OH-浓度增加，OH-则与弱酸性盐结合形成弱碱性化合物，培养基pH也不会过度升高。但KH2PO4 和K2HPO4缓冲系统只能在一定的pH范围内（6.4-7.2）起调节作用。有些微生物，如乳酸菌能大量产酸，上述缓冲系统就难以起到缓冲作用，此时可在培养基中添加难溶的碳酸盐（如CaCO3）来进行调节，CaCO3难溶于水，不会使培养基pH过度升高，但它可以不断中和微生物产生的酸，同时释放出CO2，将培养基pH控制在一定范围内。在培养基中还存在一些天然的缓冲系统，如氨基酸、肽、蛋白质都属于两性电解质，也可起到缓冲剂的作用。
利用三角培养瓶制备培养基：包扎，分装好后，塞上棉塞，在用牛皮纸将棉塞包裹好，防止灭菌时水份进入把棉塞弄湿。灭菌，按配方上要求的温度、压力进行高压蒸汽灭菌。如果灭菌的温度太高，营养成分会被破坏，培养基中的糖、氨基酸会使培养基的颜色变深。摆斜面，灭菌后需要摆斜面的试管要趁热斜着摆放，使其凝固成为一个斜面，约占试管长度的1/2。贮存，培养基在30℃下放置，无污染的即可使用。一般用牛皮纸包裹好存放于2-8℃冰箱中备用。培养基是细胞生长的必需营养物质，利用三角培养瓶制备培养基可按照以上步骤操作，在使用前需确保培养基的无菌性，以免影响细胞正常繁殖。液体培养基具有进行通气培养、振荡培养的优点。
配制培养基的原则：灭菌处理：为了避免杂菌污染，获得微生物纯培养物，培养基必须及时严格灭菌。通常采用高压蒸汽灭菌。一般培养基用0. IMPa (121℃)维持15 ~ 30min即可彻底灭菌。长时间的高温灭菌会使某些不耐热的物质破坏，如使糖类物质形成氨基糖、焦糖。因此，含糖培养基常用0.05MPa (110℃) 灭菌20 ~ 30min某些对糖类要求更高的培养基，可先将糖过滤除菌或间歇灭菌，再与其他已灭菌的成分混合。长时间高温灭菌也会使磷酸盐、碳酸盐与钙、镁铁等阳离子形成难溶性化合物而产生沉淀。为了防止这类沉淀发生，可将这些物质分别灭菌，冷却后再混合；也可在培养基中加入少量整合剂(0.01%乙二胺四乙酸，即EDTA)使金属离子形成可溶性络合物，防止沉淀的产生。高压蒸汽灭菌一般使培养基 pH降低， 应在配制培养基时加以调节。按一般微生物生长繁殖所需要的基本营养物质配制的培养基即成为基础培养基。抚顺培养基制备器直销厂家
对一些需严格灭菌的培养基（如组织培养基），较长时间的贮存，必须放在3~6℃的冰箱内。包头培养基制备器厂家
简单制作培养基，需要完成以下几个主要步骤：需要对其进行消毒处理，普通介质使用121℃高压蒸汽灭菌15分钟。本发明适用于各种介质的制备，如无特殊要求，可用于灭菌。一些热成分，如碳水化合物，应该单独制备20%或更多的浓缩液，过滤或间断杀菌，然后通过无菌操作技术加入到培养液中。在低温下，明胶培养基也能杀菌。血、体液及素应经无菌处理后，加至约50℃冷却培养基中。需要对培养基的质量进行检测。每次处理完培养基，都要仔细检查，如破损、浸渍、颜色异常、棉塞污染等，要进行筛选和弃置，才能确定 pH值。培养基培养一晚，若有细菌生长，培养基将被丢弃。常规菌株接种1×2管或瓶培养基，24 h培养，对生长不良或无菌的菌株进行培养，追踪其产生原因，并反复接种。如不发生变化，应丢弃培养基，禁止使用。包头培养基制备器厂家
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