三角培养瓶是细胞培养中的常用耗材,也可用于培养基的配制、混合及储存。利用三角培养瓶制备培养基可以按照以下步骤操作:配料:配方换算→在容器中加入少量水(蒸馏水,自然水)→按照配方称取各种药品(依次加入)→加足所需水量(一药一勺,取药后立即盖上瓶盖)。溶解:淀粉溶解:少量冷水调成糊状。加热溶解,特别是加有琼脂的培养基,一定要煮沸,琼脂的熔解温度95-97℃ ,且需要边加热边搅拌以防止烧焦。调PH:用1N的盐酸或1N的 NaOH把培养基调节到所要求的值。过滤:滤纸或棉花进行过滤。分装:一般培养基放在三角瓶或试管中灭菌使用。三角培养瓶:若作静置培养,则100ml培养基/250ml的三角培养瓶,很多不能超过150ml培养基/250ml的三角瓶,否则灭菌时培养基沸腾容易污染棉塞,造成染菌;若作摇瓶培养,则15-20ml培养基/250ml的三角瓶,保证通气良好,台州培养基制备器直销。试管分装:液体培养基一般装4-5ml,台州培养基制备器直销,台州培养基制备器直销,约试管的1/4高度;固体斜面培养基一般装3-4ml,约试管的1/5高度。培养基各成份的混合和溶化:培养基所用化学药品均应是化学纯的。台州培养基制备器直销
微生物检验培养基制备的要点:培养基倒入平板,将灭菌溶化的培养基冷却至五十度后,倒入无菌干燥的培养皿中。微生物培养基制备的温度不能太高,否则培养皿内盖容易形成过多的冷凝水;温度太低,中 海培养基容易凝固成块状,不能做成平板。倒平板时,要靠近酒精的火焰以防止外来细菌落入盘中。左手托住培养皿,右手托住三角瓶底部。用小指和手掌拉出锥形瓶的棉塞,烧灼烧瓶口,用拇指和食指在培养皿盖上打开一条缝,直到烧瓶口刚好伸手进去,倒入培养基,直到底部被覆盖。不要超过培养皿高度的三分之一,迅速盖上盖子,放在桌子上,轻轻旋转培养皿,使培养基分布均匀,凝结后即可。阜新培养基制备器厂家哪家好一般液体培养基可用滤纸过滤法,滤纸应拆叠成折扇成漏斗形。
微生物检验培养基制备的要点:培养基溶化,将中海培养基纳入烧杯容器中,加小适量的水,缓慢加水并用玻璃棒小幅度搅拌。倘若培养基中不含琼脂,则不需要对培养基加热;相反含有琼脂,就需要用本生灯/电磁炉加热煮沸。待培养基完全溶解后再加入适量的水搅拌均匀。如准备的北京中海培养基较多,在不锈钢锅中融化加热,可以用温水加热,需不停搅拌,防止焦化。如果不小心出现焦化现象,则制备好的培养基将无法使用,必须重新配制中海生物培养基。不要使用铜或铁容器溶解制备培养基,因为铜或铁容器可能会导致容器内培养基中铜、铁超标,影响实验结果,其中培养基中铜含量大于0.3毫克每升,细菌不适宜生长。铁含量超过0.14毫克每升,防止细菌产生有毒的。容易发生反应和沉淀的药物应单独溶解,然后加入培养基中,如磷酸氢二钾和硫酸镁。
配制培养基的原则:灭菌处理:为了避免杂菌污染,获得微生物纯培养物,培养基必须及时严格灭菌。通常采用高压蒸汽灭菌。一般培养基用0. IMPa (121℃)维持15 ~ 30min即可彻底灭菌。长时间的高温灭菌会使某些不耐热的物质破坏,如使糖类物质形成氨基糖、焦糖。因此,含糖培养基常用0.05MPa (110℃) 灭菌20 ~ 30min某些对糖类要求更高的培养基,可先将糖过滤除菌或间歇灭菌,再与其他已灭菌的成分混合。长时间高温灭菌也会使磷酸盐、碳酸盐与钙、镁铁等阳离子形成难溶性化合物而产生沉淀。为了防止这类沉淀发生,可将这些物质分别灭菌,冷却后再混合;也可在培养基中加入少量整合剂(0.01%乙二胺四乙酸,即EDTA)使金属离子形成可溶性络合物,防止沉淀的产生。高压蒸汽灭菌一般使培养基 pH降低, 应在配制培养基时加以调节。一般培养基在受热、吸潮后,易被细菌污染或分解变质,因此一般培养基必须防潮、避光、阴凉处保存。
培养基配置原则:营养物质浓度及配比合适,培养基中营养物质浓度合适时微生物才能生长良好,营养物质浓度过低时不能满足微生物正常生长所需,浓度过高时则可能对微生物生长起抑制作用,例如高浓度糖类物质、无机盐、重金属离子等不但不能维持和促进微生物的生长,反而起到抑菌或杀菌作用。另外,培养基中各营养物质之间的浓度配比也直接影响微生物的生长繁殖和(或)代谢产物的形成和积累,其中碳氮比(C/N)的影响较大。严格地讲,碳氮比指培养基中碳元素与氮元素的物质的量比值,有时也指培养基中还原糖与粗蛋白之比。例如,在利用微生物发酵生产谷氨酸的过程中,培养基碳氮比为4/1时,菌体大量繁殖,谷氨酸积累少;当培养基碳氮比为3/1时,菌体繁殖受到抑制,谷氨酸产量则大量增加。再如,在发酵生产过程中,可以通过控制培养基中有效氮(或碳)源与迟效氮(或碳)源之间的比例来控制菌体生长与的合成协调。制备培养基的操作要点:易于控制微生物的生长代谢状态。泰州培养基制备器哪家质量好
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利用三角培养瓶制备培养基:包扎,分装好后,塞上棉塞,在用牛皮纸将棉塞包裹好,防止灭菌时水份进入把棉塞弄湿。灭菌,按配方上要求的温度、压力进行高压蒸汽灭菌。如果灭菌的温度太高,营养成分会被破坏,培养基中的糖、氨基酸会使培养基的颜色变深。摆斜面,灭菌后需要摆斜面的试管要趁热斜着摆放,使其凝固成为一个斜面,约占试管长度的1/2。贮存,培养基在30℃下放置,无污染的即可使用。一般用牛皮纸包裹好存放于2-8℃冰箱中备用。培养基是细胞生长的必需营养物质,利用三角培养瓶制备培养基可按照以上步骤操作,在使用前需确保培养基的无菌性,以免影响细胞正常繁殖。台州培养基制备器直销
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