[VIP第1年] 指数:3
培养基配制：配制用水，培养基的大部分是水，所以水的质量直接影响培养基的质量。按Waymouth标准，水的电阻应为200万欧姆，一般实验室里以玻璃蒸馏器制备的双蒸水或三蒸水可以符合使用条件。培养基：培养基有天然、人工两种。一般实验室使用的是RPMI-1640粉末培养基，以双蒸或三蒸水配制。NaHCO3（或HCl）调pH至7.2-7.4，若pH值超过7.6或远低于6.8，则大多数细胞不能生长。RPMI-1640不耐高压灭菌，使用前需经灭菌0.22μm孔径滤膜滤过处理。血清：培养中常使用小牛血清（或胎牛血清）。血清亦不能高压灭菌，青岛培养基制备器直销，无菌的小牛血清需在56℃水浴30分钟灭活补体，置4℃冰箱存放待用。配制时含量视培养细胞种类、时间而定，一般用10—15%。由于血清成分复杂，青岛培养基制备器直销、条件不易控制，青岛培养基制备器直销，可选用无血清培养基。液体培养基：为确定液体培养基的生长率，应接种适当的培养物。青岛培养基制备器直销
培养基配置原则：营养物质浓度及配比合适，培养基中营养物质浓度合适时微生物才能生长良好，营养物质浓度过低时不能满足微生物正常生长所需，浓度过高时则可能对微生物生长起抑制作用，例如高浓度糖类物质、无机盐、重金属离子等不但不能维持和促进微生物的生长，反而起到抑菌或杀菌作用。另外，培养基中各营养物质之间的浓度配比也直接影响微生物的生长繁殖和（或）代谢产物的形成和积累，其中碳氮比（C/N）的影响较大。严格地讲，碳氮比指培养基中碳元素与氮元素的物质的量比值，有时也指培养基中还原糖与粗蛋白之比。例如，在利用微生物发酵生产谷氨酸的过程中，培养基碳氮比为4/1时，菌体大量繁殖，谷氨酸积累少；当培养基碳氮比为3/1时，菌体繁殖受到抑制，谷氨酸产量则大量增加。再如，在发酵生产过程中，可以通过控制培养基中有效氮（或碳）源与迟效氮（或碳）源之间的比例来控制菌体生长与的合成协调。吕梁培养基制备器直销紫外线作用于核酸蛋白促使其变性，同时空气受紫外线照射后产生微量臭氧，从而起共同杀菌作用。
简单制作培养基，需要完成以下几个主要步骤：简单制作培养基，必须将其过滤并澄清液体介质必须完全澄清，普通液体介质可用滤纸过滤，滤纸应折成折扇状或漏斗状，以免滤纸因水力不均而破裂。当温度较高时，培养基可以用干净的白天鹅绒过滤。新制肉、肝、血、马铃薯等滤液，必须用丝绒布过滤，再用滤纸一次又一次地过滤。若过滤方法不能满足澄清的要求，则应采用蛋清过滤。需要对介质分类处理，按培养基及试管内其它烧瓶使用的容器、用途分为适当。货运量超过每2个集装箱3个容量包装的要求。封堵也是容器外包，可用防水防潮纸塞纸封堵容器内棉。电动式装配机采用定量很好的重用或半自动解。预处理和预处理对灭菌容器的清洗要干燥，灭菌时要彻底，培养基要干燥。一只小玻璃瓶批培养基被检测出，培养基被一批 pH批作为该值基准时，应被分成20 mL的培养基进行消毒处理。
培养基制备基本方法：培养基配方的选定，同一种培养基的配方在不同著作中常会有某些差别。因此，除所用的是标准方法，应严格按其规定进行配制外，一般均应尽量收集有关资料，加以比较核对，再依据自己的使用目的加以选用，记录其来源。培养基pH的初步调整，培养基各成分完全溶解后，应进行pH的初步调正，因培养基在加热消毒过程中、pH会有所变化，例如，牛肉浸液约可降低pH0.2。而肠浸液pH却会有明显的升高。因此，对这个步骤，操作者应随时注意探索经验、以期能掌握培养基的很终pH，保证培养基的质量。pH调正后，还应将培养基煮沸数分钟，以利培养基沉淀物的析出。培养基的不正确制备会导致培养基出现质量问题。
配制培养基的原则：灭菌处理：为了避免杂菌污染，获得微生物纯培养物，培养基必须及时严格灭菌。通常采用高压蒸汽灭菌。一般培养基用0. IMPa (121℃)维持15 ~ 30min即可彻底灭菌。长时间的高温灭菌会使某些不耐热的物质破坏，如使糖类物质形成氨基糖、焦糖。因此，含糖培养基常用0.05MPa (110℃) 灭菌20 ~ 30min某些对糖类要求更高的培养基，可先将糖过滤除菌或间歇灭菌，再与其他已灭菌的成分混合。长时间高温灭菌也会使磷酸盐、碳酸盐与钙、镁铁等阳离子形成难溶性化合物而产生沉淀。为了防止这类沉淀发生，可将这些物质分别灭菌，冷却后再混合；也可在培养基中加入少量整合剂(0.01%乙二胺四乙酸，即EDTA)使金属离子形成可溶性络合物，防止沉淀的产生。高压蒸汽灭菌一般使培养基 pH降低， 应在配制培养基时加以调节。为防止冷凝水过多，也可将培养基冷却至45 ~ 50°C再倒平板。青岛培养基制备器直销
培养基各成份的混合和溶化：培养基所用化学药品均应是化学纯的。青岛培养基制备器直销
基础培养基各种微生物的营养要求虽不相同，但多数微生物需要的基本营养物质相同。按一般微生物生长繁殖所需要的基本营养物质配制的培养基即成为基础培养基。牛肉膏蛋白胨培养基就是很常用的基础培养基，它可作为一些特殊培养基的基本成分，再根据某种微生物的特殊要求，在基础培养基中添加所需营养物质。根据培养基的特殊用途可分为基础培养基、加富培养基、选择培养基和鉴别培养基等。基础培养基：含有细菌生长繁殖所需的基本营养物质，可供大多数细菌生长。在牛肉浸液中加入适量的蛋白胨、氯化钠、磷酸盐，调节 pH7.2～7.6，经灭菌处理后，即为基础液体培养基；如再加入0.3%～0.5%的琼脂，则为基础半固体培养基；加入1%～2%的琼脂，则为基础固体培养基。牛肉膏蛋白胨培养基就是很常用的基础培养基，它可作为一些特殊培养基的基本成分，再根据某种微生物的特殊要求，在基础培养基中添加所需营养物质。青岛培养基制备器直销
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