培养基制备的基本方法和注意事项:1.培养塞 pH 的初步调整 培养基各成分完全溶解后,应进行 pH 的初步调正,因培养基在加热消毒过程中、pH 会 有所变化,例如,牛肉浸液约可降低 pH0.2.而肠浸液 pH 却会有明显的升高。因此,对 这个步骤,操作者应随时注意探索经验、以期能掌握培养基的较终 pH ,保证培养基的 质量。pH 调正后,还应将培养基煮沸数分钟,以利培养基沉淀物的析出。2.培养基的过滤澄清 液体培养基必须澄清,琼脂培养基也应透明无明显沉淀,青岛培养基制备器直销,因此,须要采用过滤或其 它澄清方法以达到此项要求。一般液体培养基可用滤纸过滤法,青岛培养基制备器直销,青岛培养基制备器直销,滤纸应拆叠成折扇成漏 斗形,以避免因液压不均匀而引起滤纸破裂。 培养基的不正确制备会导致培养基出现质量问题。青岛培养基制备器直销
培养基的分装:培养基的分装,应按使用的目的和要求,分装于试管、烧瓶等适当容器内。分装量不得超过容器装盛量的2/3。容器口可用垫有防湿纸的棉塞封堵,其外还须用防水纸包扎(现试管一般多有用螺旋盖者)。分装时较好能使用半自动或电动的定量分装器。分装琼脂斜面培养基时,分装量应以能形成2/3底层和1/3斜面的量为洽当。分装容器应预先清洗干净并经干烤消毒,以利于培养基的彻底灭菌。每批培养基应另外分装20ml培养基于一小玻璃瓶中,随该批培养基同时灭菌,以为测定该批培养基较终pH之用。青岛培养基制备器直销全自动培养基制备仪主要特点:灭菌-加热-搅拌-混合-冷却一体化控制。
实验室在制作培养基时候的经验总结:1、培养基成份称量:培养基的各种成分必须精确称取并要注意防止错乱,较好一次完成,不要中断。可将配方置于傍侧,每称完一种成分即在配方上做出记号,并将所需称取的药品一次取齐,置于左侧,每种称取完毕后,即移放于右侧。完全称取完毕后,还应进行一次检查。2、培养基成份的混合与溶化:培养基所用化学药品均应是化学纯的。使用的蒸煮锅不得为铜锅或铁锅,以防有微量铜或铁混入培养基中,使细菌不易生长。较好使用不锈钢加热溶化,可放入大烧杯或大烧瓶中置于高压蒸汽灭菌器或流动蒸汽消毒器中蒸煮溶化。
在制备培养基时,通常要考虑以下因素:(1)pH值多数细胞系在pH=7.4下生长得很好。尽管各细胞株之间细胞生长zui*pH值变化很小,但一些正常的成纤维细胞系以pH=7.4~7.7zui 好,转化细胞以pH=7.0~7.4更合适。据报道,上皮细胞以pH=5.5合适。为确定*佳pH值,做一个简单的生长实验或特殊功能分析酚红常用作指示剂,pH=7.4呈红色,pH=7.0变橙色,pH=6.5变黄色,而pH=7.6呈红色中略带蓝色,pH=7.8呈紫色。由于对颜色的观 察有很大的主观性,因而必须用无菌平衡盐溶液和同样浓度的酚红配一套标准样,放在与制备培养基相同的瓶子中。(2)缓冲能力碳算盐缓冲系统由于毒性小、成本低、对培养物有营养作用,因此比其他缓冲系统用得多。在pH值条件下的缓冲能力差。(3)渗透压多数培养细胞对渗透压有很宽的耐受范围,一般常用冰点降低或蒸汽压升高测定。如果自己配培养基,可通过测定渗透压防止称量和稀释等造成的误差。制备培养基的操作要点:成分基本上溶于水,没有明显的固形物,。
培养基各成份的混合和溶化:培养基所用化学药品均应是化学纯的。使用的蒸煮锅不得为铜锅或铁锅,避免有微量铜或铁混入培养基中,使细菌不易生长。Z好使用不锈钢锅加热溶化,也可放入大烧杯或大烧瓶中置高压蒸汽灭菌器或流动蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在锅中溶化时、可先用温水加热并随时扰动,以防焦化、如发现有焦化现象、该培养基即不能使用,应重新制备。待大部分固体成分溶化后,再用较小火力使所有成分完全溶化。迄至煮沸。如为琼脂培养基,应先用一部分水将琼脂溶化,用另一部分水溶化其它成分,然后将两溶液充分混合。在加热溶化过程中,因蒸发而丢失的水分,Z后必须加以补足。制备培养基的操作要点:固体培养基在液体培养基中加入适量的凝固剂即成固体培养基。吉林培养基制备器厂家
全自动培养基制备仪主要特点:保证细菌不被引入容器中。青岛培养基制备器直销
培养基的质量测试: 每批培养基制备好以后,应仔细检查一遍,如发现破裂、水分浸入、色泽异常、棉塞被培养基沾染等、均应挑出弃去。并测定其好终pH。 将全部培养基放入36±1°C恒温箱培养过夜,如发现有菌生长,即弃去。 用有关的标准菌株接种1~2管或瓶培养基,培养24~48小时,如无菌生长或生长不好。应追查原因并重复接种一次,如结果仍同前,则该批培养基即应弃去,不能使用。 培养基的保存: 培养基应存放于冷暗处,好好能放于普通冰箱内。放置时间不宜超过一周,倾注的平板培养基不宜超过3天。每批培养基均必须附有该批培养基制备记录副页或明显标签。台州培养基制备器报价培养基制备器外控高低电平控制启停,正反,简易分装,光耦隔离;外控模拟量调节转速。青岛培养基制备器直销
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