[VIP第1年] 指数:3
孢子培养基：孢子培养基是供菌种繁殖孢子的一种常用固体培养基，对这种培养基的要求是能使菌体迅速生长，产生较多较好的孢子，并要求这种培养基不易引起菌种发生变异。所以对孢子培养基的基本配制要求是：靠前，营养不要太丰富（特别是有机氮源），否则不易产孢子。如灰色链霉在葡萄糖-硝酸盐-其它盐类的培养基上都能很好地生长和产孢子，但若加入0.5%酵母膏或酪蛋白后，就只长菌丝而不长孢子。第二，所用无机盐的浓度要适量，不然也会影响孢子量和孢子颜色。第三，要注意孢子培养基的pH和湿度。生产上常用的孢子培养基有：麸皮培养基、小米培养基、大米培养基、玉米碎屑培养基和用葡萄糖、蛋白胨、牛肉膏和食盐等配制成的琼脂斜面培养基。大米和小米常用作霉菌孢子培养基，因为它们含氮量少，疏松、表面积大，所以是较好孢子培养基。大米培养基的水分需控制在21%－50%，而曲房空气湿度需控制在90%－靠前。培养基制备器培养基的各种成分必须精确称取并要注意防止错乱，较好一次完成，不要中断。上海全自动培养基制备器
配制好的培养基保存：灭菌以后培养基应该迅速冷却至所需温度，避免长时间保存在灭菌锅内，造成过度灭菌，影响培养基的营养成分或选择性效果。所配制的培养基的量，应该是在较长保存期限内正好使用完。含染料的培养基应闭光保存;倒好的琼脂平板如果配制的当天未使用完，应于冷藏保存，如果保存时间超过2天，应将其放入密封的塑料袋中保存;配好的肉汤类培养基如果保存时间超过2个星期，应将其放在带有螺旋盖的试管或其它密闭的试管或容器中防止蒸发。上海不锈钢内桶培养基制备器天然培养基是指一类利用动物、植物或微生物体包括其提取物制成的培养基。
加棉塞：分装完毕后，需要用棉塞堵住管口或瓶口。堵棉塞的主要目的是过滤空气，避免污染。棉塞应采用普通新鲜、干燥的棉花制作，不要用脱脂棉，以免因脱脂棉吸水使棉塞无法使用。制作棉塞时，要根据棉塞大小将棉花铺展成适当厚度，揪取手掌心大小一块，铺在左手拇指与食指圈成的圆孔中，用右手食指插入棉花中部，同时左手食指与姆指稍稍紧握，就会形成1个长棒形的棉塞。棉塞作成后，应迅速塞入管口或瓶口中，棉塞应紧贴内壁不留缝隙，以防空气中微生物沿皱折侵入。棉塞不要过紧过松，塞好后,，以手提棉塞、管、瓶不下落为合适。棉塞的2/3应在管内或瓶内，上端露出少许棉花便于拔取。塞好棉塞的试管和锥形瓶应盖上厚纸用绳捆札，准备灭菌。
培养基制备操作步骤：(一)准确称量试剂根据不同的菌类和用途，选择适宜的培养基，培养基所需试剂必须纯净。(二)校正pH值将称量好的培养基各种成分放入容器内，标记划线，加热溶解，补充水分，测定酸碱度，常用pH6.8～8.0的精密试纸或酸度计测定。用1NNaOH和1NHCl调节pH值到适宜范围内。(三)过滤将玻璃漏斗置铁架上，再用纱布夹棉花或用滤纸放在漏斗中，将上述培养基倒入其中过滤至透明。(四)分装将过滤后的培养基分装于中试管或三角瓶内(试管内每支装5mL;三角瓶中装100～150ml)，塞好棉塞用牛皮纸包扎好，准备灭菌。(五)灭菌培养基的灭菌，常用高压蒸汽灭菌法。一般微生物的营养细胞在水中煮沸后即被杀死，但细菌的芽胞有较强的抗热性，须经高压蒸汽灭菌才能达到彻底灭菌的目的。在配制培养基时应尽量利用廉价且易于获得的原料作为培养基成分。
分装：配制好的培养基根据不同的用途分装在三角瓶、试管等容器中，分装试管，如果试管量很大，可用自动分液器。如果试管量少，可用漏斗分装。分装量不超过容器容积的三分之二。三角瓶以不超过容积的二分之一为宜；琼脂斜面以不超过试管长度的五分之一为宜，灭菌后，摆成的斜面为培养基的三分之一、底层为三分之二的量为宜；半固体琼脂分装量为试管长度的的三分之一；用来接种或保菌的高层琼脂，分装量为试管长度的四分之一或三分之一，用来接种厌氧菌的要达到三分之二；琼脂平板，内径90mm的以13ml~15ml为宜，内径70mm的平板为8ml~10ml，制成的琼脂平板。全自动培养基制备分装系统：一键选择培养皿类型;整合数据库，预设培养皿尺寸选择程序。上海全自动培养基制备器
培养基制备器通过分装口可以定量添加无菌添加剂。上海全自动培养基制备器
实验室在制作培养基时候的经验总结：培养基分装：培养基的分装，应按使用的目的和要求，分装于试管、烧瓶等适当容器内。分装量不得超过容器装盛量的2/3。容器口可用垫有防湿纸的棉塞封堵，其外还须用防水纸包扎(现试管一般多有用螺旋盖者)。分装时较好能使用半自动或电动的定量分装器。分装琼脂斜面培养基时，分装量应以能形成2/3底层和1/3斜面的量为恰当。分装容器应预先清洗干净并经干烤消毒，以利于培养基的彻底灭菌。每批培养基应另外分装20ml培养基于一小玻璃瓶中，随该批培养基同时灭菌，以为测定该批培养基较终pH之用。上海全自动培养基制备器
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