培养基的配制:1、配料:在容器中加入少量水,按照配方称取各种药品,加足所需水量(一药一勺,取药后立即盖上瓶盖)。2、溶解:淀粉溶解:少量冷水调成糊状,加热溶解,特别是加有琼脂的培养基,一定要煮沸,琼脂的熔解温度95-97℃,且需要边加热边搅拌以防止烧焦。3、调PH:用1N的盐酸或1N的NaOH把培养基调节到所要求的值。4、过滤:滤纸或棉花进行过滤。5、分装:一般培养基放在三角瓶或试管中灭菌使用。(1)三角瓶:若作静置培养,则100ml培养基/250ml的三角瓶,较多不能超过150ml培养基/250ml的三角瓶,否则灭菌时培养基沸腾容易污染棉塞,造成染菌;若作摇瓶培养,则15-20ml培养基/250ml的三角瓶,保证通气良好。(2)试管分装:液体培养基一般装4-5ml,约试管的1/4高度。固体斜面培养基一般装3-4ml,约试管的1/5高度。6、包扎:分装好后,塞上棉塞,在用牛皮纸将棉塞包裹好,防止灭菌时水份进入把棉塞弄湿。7、灭菌:按配方上要求的温度、压力进行高压蒸汽灭菌。如果灭菌的温度太高,营养成分会被破坏,培养基中的糖、氨基酸会使培养基的颜色变深。液体培养基在静止的条件下,在菌体或培养细胞的周围,形成透过养分的壁障,养分的摄入受到阻碍。上海培养基制备器定制
常用培养基的制备及注意事项一、实验目的了解培养基的配制原理;掌握配制培养基的一般方法和步骤;了解常见灭菌、清毒基本原理及方法;掌握干热天菌、高压蒸汽灭菌及过滤除菌的操作方法。二、实验原理培养基是人工按一定比例配制的供微生物生长繁殖和合成代谢产物所需要的营养物质的混合物。培养基的原材料可分为碳源、氮源、无机盐、生长因素和水。根据微生物的种类和实验目的不同,培养基也有不同的种类和配制方法。牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用较普遍和较普通的细菌基础培养基,有时又称为普通培养基。由于这种培养基中含有一般细胞生长繁殖所需要的较基本的营养物质,所以可供微生物生长繁殖之用。干热天菌、高压蒸汽灭菌方法主要是通过升温使蛋白质变性从而达到杀死微生物的效果。上海培养基制备器定制培养基制备器试管塞不要塞得太紧(使用硅胶塞的时候),勿使用橡皮塞。
—种培养基制备分装一体机,其包括培养基制备器和自动分装系统,以及分别与该培养基制备器和自动分装系统连接的控制系统,其中所述培养基制备器包括外装壳体,该外装壳体设有容腔,所述容腔内设有搅拌罐,所述搅拌罐与所述容腔内壁呈间隔设置,其内设有夹腔,所述搅拌罐的底部与所述容腔内壁之间设有磁力搅拌器,所述磁力搅拌器的搅拌子向上延伸穿过所述搅拌罐的底部伸入至搅拌罐中;所述容腔的顶部设有外装箱盖,所述外装箱盖上设有箱盖保险锁;所述外装箱盖上分别设有分装连接孔和传感器安装孔,所述分装连接孔上设有带流量栗的出料管,所述出料管一端向外延伸穿过所述外装箱盖与所述自动分装系统连接,其另一端向内延伸伸入至培养基底部,所述传感器安装孔上连接有温度传感器,所述温度传感器也向下延伸伸入至培养基内;所述外装壳体上端设有多个进水管,所述进水管向内延伸穿过所述夹腔与所述搅拌罐内壁触接,所述外装壳体底部设有至少一个出水管,所述容腔底部设有加热元件;所述流量栗、磁力搅拌器、温度传感器、进水管和出水管、加热元件均与所述控制系统连接。
种子培养基:种子培养基是供孢子发芽、生长和大量繁殖菌丝体,并使菌体长得粗壮,成为活力强的“种子”。所以种子培养基的营养成分要求比较丰富和完全,氮源和维生素的含量也要高些,但总浓度以略稀薄为好,这样可达到较高的溶解氧,供大量菌体生长繁殖。种子培养基的成分要考虑在微生物代谢过程中能维持稳定的pH,其组成还要根据不同菌种的生理特征而定。一般种子培养基都用营养丰富而完全的天然有机氮源,因为有些氨基酸能刺激孢子发芽。但无机氮源容易利用,有利于菌体迅速生长,所以在种子培养基中常包括有机及无机氮源。较后一级的种子培养基的成分好好能较接近发酵培养基,这样可使种子进入发酵培养基后能迅速适应,快速生长。培养基是生物制品领域中常用的物质,在细菌和细胞培养中十分必要。
培养基制备的基本方法和注意事项:1.培养塞pH的初步调整培养基各成分完全溶解后,应进行pH的初步调正,因培养基在加热消毒过程中、pH会有所变化,例如,牛肉浸液约可降低pH0.2.而肠浸液pH却会有明显的升高。因此,对这个步骤,操作者应随时注意探索经验、以期能掌握培养基的较终pH,保证培养基的质量。pH调正后,还应将培养基煮沸数分钟,以利培养基沉淀物的析出。2.培养基的过滤澄清液体培养基必须澄清,琼脂培养基也应透明无明显沉淀,因此,须要采用过滤或其它澄清方法以达到此项要求。一般液体培养基可用滤纸过滤法,滤纸应拆叠成折扇成漏斗形,以避免因液压不均匀而引起滤纸破裂。异养微生物的合成能力较弱,不能以CO2作为碳源或主要碳源,故应在培养基中至少添加一种有机物。上海培养基制备器定制
培养基制备器勿将血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清会变得混浊。上海培养基制备器定制
培养基的化学成分包括水、无机盐、碳源、氮源(生长因子)等。(1)碳源:能为微生物的代谢提供碳元素的物质。如CO2、NaHCO3等无机碳源;糖类、石油、花生粉饼等有机碳源。异养微生物只能利用有机碳源。单质碳不能作为碳源。(2)氮源:能为微生物的代谢提供氮元素的物质。如N2、NH3、NO3-、NH4+(无机氮源)蛋白质、氨基酸、尿素、牛肉膏、蛋白胨(有机氮源)等。只有固氮微生物才能利用N2。培养基还要满足微生物生长对PH、特殊营养物质以及氧气的要求。例如,培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素,培养霉菌时须将培养基的pH调至酸性,培养细菌是需要将pH调至中性或微碱性,培养厌氧型微生物是则需要提供无氧的条件。上海培养基制备器定制
文章来源地址: http://yiqiyibiao.chanpin818.com/swyqxm/qtswyq/deta_21497096.html
免责声明: 本页面所展现的信息及其他相关推荐信息,均来源于其对应的用户,本网对此不承担任何保证责任。如涉及作品内容、 版权和其他问题,请及时与本网联系,我们将核实后进行删除,本网站对此声明具有最终解释权。