[VIP第1年] 指数:3
培养基的质量测试：每批培养基制备好以后，应仔细检查一遍，如发现破裂、水分浸入、色泽异常、棉塞被培养基沾染等、均应挑出弃去。并测定其较终pH。将全部培养基放入36±1°C恒温箱培养过夜，如发现有菌生长，即弃去。用有关的标准菌株接种1~2管或瓶培养基，培养24~48小时，如无菌生长或生长不好。应追查原因并重复接种一次，如结果仍同前，则该批培养基即应弃去，不能使用。培养基的保存：培养基应存放于冷暗处，较好能放于普通冰箱内。放置时间不宜超过一周，倾注的平板培养基不宜超过3天。每批培养基均必须附有该批培养基制备记录副页或明显标签。培养基各成份的混合和溶化：培养基所用化学药品均应是化学纯的。河南琼脂灭菌 培养基制备器
配制培养基的原则：根据培养目的需要选择适宜的营养物质。由于微生物营养类型复杂，不同微生物有不同的营养要求。因此，要根据不同微生物的营养需求选择适宜的营养物质，配制针对性强的培养基。自养微生物有较强的合成能力，能以简单的无机物如co2和无机盐合成复杂的细胞物质。因此，培养自养微生物的培养基应由简单的无机物组成。异养微生物的合成能力较弱，不能以CO2作为碳源或主要碳源，故应在培养基中至少添加一种有机物。注意营养物质的浓度与配比要合适：微生物只有在营养物质浓度及其比例合适时才能良好生长。营养物质浓度过低不能满足现生长需要，过高又抑制其生长。例如，适量的蔗糖是异养微生物的良好碳源和能源，但高浓度蔗糖则抑制菌体生长。金属离子是微生物生长所不可缺少的矿质养分，但浓度扩大，尤其是重金属离子，反而抑制其生长，甚至产生杀菌作用。河南琼脂灭菌 培养基制备器制备培养基的操作要点：固体培养基在实际中用得十分普遍。
调pH：虽然培养基中含有缓冲物质成分，能使培养基的pH尽可能的保持在要求的范围内，但是配出的培养基若不符合要求，就要进行必要的调整。如果有已校准pH计，可用pH计。如果没有，可用精密的pH试纸，再根据需要用1mol/L氢氧化钠或1mol/L盐酸（微调可用0.1mol/L氢氧化钠或0.1mol/L盐酸）调制所需的pH。培养基的pH一般为7.4~7.6，也有酸性或碱性的。用氢氧化钠调整的需要高压灭菌的培养基，在调整pH时要调至高出所需0.1个~0.2个单位，因用氢氧化钠提哦啊正时，高压灭菌后，培养基大的pH要降低0.1~0.2。如培养基中含有碳酸钙成分，可不调pH。
灭菌：分装好的培养基应立即进行灭菌。灭菌的方法种类如下：1.高压蒸汽灭菌法:大多数热培养基都可用此法，小量分装时，用121℃、15min；灭菌量大时，用121℃、30min灭菌；含糖类的培养基只能113℃~115℃、15min灭菌，避免糖类遭破坏。2.煮沸灭菌:对含有不耐高温物质的培养基，可使用此方法。3.过滤除菌:以过滤的方法除菌，用无菌操作技术，定量加入培养基。血液、物品可用无菌操作技术抽取，加入冷却到50℃左右的培养基中。培养基含有不耐热的物质时，可用此法。培养基制备器试管塞不要塞得太紧（使用硅胶塞的时候），勿使用橡皮塞。
培养基配置原则：控制pH条件，培养基的pH必须控制在一定的范围内，以满足不同类型微生物的生长繁殖或产生代谢产物。各类微生物生长繁殖或产生代谢产物的很适pH条件各不相同，一般来讲，细菌与放线菌适于在pH7-7.5范围内生长，酵母菌和霉菌通常在pH4.5-6范围内生长。值得注意的是，在微生物生长繁殖和代谢过程中，由于营养物质被分解利用和代谢产物的形成与积累，会导致培养基pH发生变化，若不对培养基pH条件进行控制，往往导致微生物生长速度下降或（和）代谢产物产量下降。因此，为了维持培养基pH的相对恒定，通常在培养基中加入pH缓冲剂，常用的缓冲剂是一氢和二氢磷酸盐（如KH2PO4和K2HPO4）组成的混合物。K2HPO4溶液呈碱性，KH2PO4溶液呈酸性，两种物质的等量混合溶液的pH为6.8。调节氧化还原电位(Eh) 各种微生物对培养基的Eh要求不同。河南琼脂灭菌 培养基制备器
液体培养基，80%～90%是水，其中配有可溶性的或不溶性的营养成分的培养基。河南琼脂灭菌 培养基制备器
培养基在使用前通过高压或过滤灭菌。防止污染应该注意以下事项：确认工作细胞库是否被污染，确认毒种工作种子批是否被污染，确认所用培养基及其添加成分（如小牛血清、NaHCO3等）是否被污染，均可用细菌、及支原体无菌试验来确认并排除。同时要对无菌试验培养基的灵敏度进行验证。实际生产中，可以从配制好的培养液中取少量加入营养琼脂于恒温培养箱内培养，48小时即可观察有无污染。其它：高压灭菌设备、过滤除菌设备均应进行验证，确保灭菌和除菌效果;前者应在投产前及其后的每6个月进行验证，后者应在每次除菌前、后进行验证工作（至少应在除菌后进行一次）。另外，应将有毒区与无毒区严格分开，并有各自独自的空气净化系统及孵室，有毒区对无毒区应保持相对负压，防止病毒对培养细胞（尤其是细胞库）的污染。河南琼脂灭菌 培养基制备器
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