微生物限度:细胞培养基不是无菌产品,其中的微生物在一定条件下会吸收细胞培养基中的营养物质滋生繁殖,导致细胞培养基变质失效,陕西大容量 培养基制备器。控制细胞培养基中细菌和霉菌,陕西大容量 培养基制备器,是延长细胞培养基有效期的方法之一,陕西大容量 培养基制备器。清大天一在参考《中华人民当地药典》2005版二部附录第100页的口服给药制剂的微生物限度标准,并严于该标准,规定细胞培养基产品的细菌数每1g不得超过200个,霉菌数每1g不得超过50个。称取样品1g,加入无菌纯化水10mL溶解,混匀即得试样。按中华人民当地药典2005年版二部附录ⅪJ微生物限度检查法进行,检查项目为细菌数、霉菌数。检查法采用平皿法。培养基的灭菌:一般培养基可采用121°C高压蒸汽灭菌15分钟的方法。陕西大容量 培养基制备器

培养基配制:配制用水,培养基的大部分是水,所以水的质量直接影响培养基的质量。按Waymouth标准,水的电阻应为200万欧姆,一般实验室里以玻璃蒸馏器制备的双蒸水或三蒸水可以符合使用条件。培养基:培养基有天然、人工两种。一般实验室使用的是RPMI-1640粉末培养基,以双蒸或三蒸水配制。NaHCO3(或HCl)调pH至7.2-7.4,若pH值超过7.6或远低于6.8,则大多数细胞不能生长。RPMI-1640不耐高压灭菌,使用前需经灭菌0.22μm孔径滤膜滤过处理。血清:培养中常使用小牛血清(或胎牛血清)。血清亦不能高压灭菌,无菌的小牛血清需在56℃水浴30分钟灭活补体,置4℃冰箱存放待用。配制时含量视培养细胞种类、时间而定,一般用10—15%。由于血清成分复杂、条件不易控制,可选用无血清培养基。四川触摸屏培养基制备器一般液体培养基可用滤纸过滤法,滤纸应拆叠成折扇成漏斗形,以避免因液压不均匀而引起滤纸破裂。

血清解冻后发现有絮状沉淀物出现,该如何处理:血清中沉淀物的出现有许多种原因,但好普遍的原因是由于血清中脂蛋白的变性所造成的,而血纤维蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血渭解冻后,也会存在于血清中,亦是造成沉淀物的主要原因之一。但这些絮状沉淀物并不影响血清本身的质量。若想去除这些絮状沉淀物,可以将血清分装至无菌离心管内,以400g稍微离心,上清液即可接着加入培养基内一起过滤。不建议以过滤的方法去除这些絮状沉淀物,因为它可能会阻塞过滤膜。何谓热灭活:一般是以56℃,30分钟来处理已解冻的血清,因为此加热步骤可以使补体去活化,而补体所参与的反应有:溶细胞活性,平滑肌的收缩,肥大细胞和血小板组胺的释放,增强吞噬作用,淋巴细胞、巨噬细胞的趋化和启动。
培养基配置原则:营养物质浓度及配比合适,培养基中营养物质浓度合适时微生物才能生长良好,营养物质浓度过低时不能满足微生物正常生长所需,浓度过高时则可能对微生物生长起抑制作用,例如高浓度糖类物质、无机盐、重金属离子等不但不能维持和促进微生物的生长,反而起到抑菌或杀菌作用。另外,培养基中各营养物质之间的浓度配比也直接影响微生物的生长繁殖和(或)代谢产物的形成和积累,其中碳氮比(C/N)的影响较大。严格地讲,碳氮比指培养基中碳元素与氮元素的物质的量比值,有时也指培养基中还原糖与粗蛋白之比。例如,在利用微生物发酵生产谷氨酸的过程中,培养基碳氮比为4/1时,菌体大量繁殖,谷氨酸积累少;当培养基碳氮比为3/1时,菌体繁殖受到抑制,谷氨酸产量则大量增加。再如,在发酵生产过程中,可以通过控制培养基中有效氮(或碳)源与迟效氮(或碳)源之间的比例来控制菌体生长与的合成协调。培养基制备器勿将血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清会变得混浊。

孢子培养基:孢子培养基是供菌种繁殖孢子的一种常用固体培养基,对这种培养基的要求是能使菌体迅速生长,产生较多较好的孢子,并要求这种培养基不易引起菌种发生变异。所以对孢子培养基的基本配制要求是:靠前,营养不要太丰富(特别是有机氮源),否则不易产孢子。如灰色链霉在葡萄糖-硝酸盐-其它盐类的培养基上都能很好地生长和产孢子,但若加入0.5%酵母膏或酪蛋白后,就只长菌丝而不长孢子。第二,所用无机盐的浓度要适量,不然也会影响孢子量和孢子颜色。第三,要注意孢子培养基的pH和湿度。生产上常用的孢子培养基有:麸皮培养基、小米培养基、大米培养基、玉米碎屑培养基和用葡萄糖、蛋白胨、牛肉膏和食盐等配制成的琼脂斜面培养基。大米和小米常用作霉菌孢子培养基,因为它们含氮量少,疏松、表面积大,所以是较好孢子培养基。大米培养基的水分需控制在21%-50%,而曲房空气湿度需控制在90%-靠前。培养基长时间的高温灭菌会使某些不耐热的物质破坏,如使糖类物质形成氨基糖、焦糖。海南实验室培养基制备器
培养基通常采用高压蒸汽灭菌。陕西大容量 培养基制备器
全自动培养基制备分装系统:1.一键选择培养皿类型;整合数据库,预设培养皿尺寸选择程序。2.全自动程序,无人值守;分装过程无需人工干预。3.运行过程顺滑无声;大程度的削减了噪音。4.铝制表面光滑平坦;易于清洁,无孔隙和裂缝,以防培养基流进去。5.两个存储器;存储器高度可选;220或440个培养皿(高为16.5mm的培养皿)预装培养皿方便;旋转存储器,可整个从Mediafill上取走,方便预装培养皿。6.整合蠕动泵(主泵);*确分装培养基。7.整合蠕动泵(附加剂泵);*确添加附加剂(可选)。8.一体化控制;主机和选配件(附加剂泵)可通过Mediafill触摸屏一起控制。陕西大容量 培养基制备器
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