简单制作培养基,需要完成以下几个主要步骤:需要选择培养基配方,同一种培养基,其表达方式往往存在着差异。所以,除了应当严格按照标准方法的规定编制之外,我们一般应尽可能收集有关数据,加以比较和核对,然后根据自己的目的选择和记录数据来源。需记录培养基的制备,培养基的制备记录包括培养基的名称、配方及其来源、pH值,中国澳门大容量 培养基制备器,中国澳门大容量 培养基制备器、灭菌温度、时间、配制日期,中国澳门大容量 培养基制备器、制备人等,并且要复印记录和保存原始记录备查。对副本的记录应该和培养基一起保存,以防出现混乱。需称重培养基的成分,培养基成分要准确称量,并注意防止混淆。每一种成分称量完毕后,都要在分装的一面打上记号,然后将分装的药物一起放在左边。每一个成分称量完之后,都会向右移动。全部称量完毕,应再次检查。培养基由于配制的原料不同,使用要求不同,而贮存保管方面也稍有不同。中国澳门大容量 培养基制备器
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培养基的重要性:培养基的质量是微生物实验室检测工作的基础,事关检测工作的准确性、可靠性,在微生物实验室检测工作中举足轻重。如果在工作中忽视任何一个环节的质量问题,都将导致检验结果科学性、客观性的偏离。因此,加强培养基的实验室质量控制,认真地做好培养基的质控工作,不断完善和提高培养基的质控水平,才能为微生物检测实验室提供高质量的培养基。灭菌,一般培养基采用湿热灭菌,即高压蒸汽灭菌。第五,pH测定,微生物必须在适宜的pH范围内才能正常生长繁殖或体现其生物特性。中国澳门大容量 培养基制备器配制培养基的原则:根据培养目的需要选择适宜的营养物质。
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在制备培养基时,通常要考虑以下因素:1.缓冲能力碳算盐缓冲系统由于毒性小、成本低、对培养物有营养作用,因此比其他缓冲系统用得多。在pH值条件下的缓冲能力差。2.渗透压多数培养细胞对渗透压有很宽的耐受范围,一般常用冰点降低或蒸汽压升高测定。如果自己配培养基,可通过测定渗透压防止3.粘度培养基的粘度主要受血清含量的影响,在多数情况下,对细胞生长没有什么影响。在搅拌条件下,用羧甲基纤维素增加培养基的粘度,可减轻细胞损害。这对在低血清浓度或无血清下条件下培养细胞显得尤为重要。
培养平板培养基是被用于获得微生物纯培养的很常用的固体培养基形式,它是冷却凝固后的固体培养基在无菌培养皿中形成的培养基固体平面,常被简称为培养平板。也叫平面培养基、平皿培养基。平板培养基常用于单孢分离,测定菌丝生长速度,观察菌落的形态,拮抗实验,测定接种空间杂菌数。平板培养基制作方法如下:将培养皿洗净、干燥,使各培养皿盖方向一致,用牛皮纸包好,或放入特制铁罐内,注明皿盖的方向。高压灭菌或干燥灭菌后备用。取刚灭菌后尚未凝固的培养基置于无菌箱或超净工作台内,先左手持三角瓶,右手反转手掌用中指和无名指拨出棉塞或硅胶赛(或不翻转手掌用小指和手掌拨出棉塞),同时将三角瓶转换至右手,而后左手拿平皿,以大拇指和中指将皿盖打开一缝,至瓶口刚好伸人。三角瓶口经火焰烧灼后,倾入灭菌或溶化、冷却至55~60°C的培养基约15mL(勿使瓶口靠在平皿壁上,以免沾染皿壁),迅速盖好皿盖,置于桌上轻轻旋转平皿,使培养基均匀分布于整个平皿底部,冷凝后即为平板培养基。有时凝固后的培养基表面有冷凝水,可将平皿盖打开倒置于37℃温箱,除去冷凝水,否则将影响平板分离培养效果。为防止冷凝水过多,也可将培养基冷却至45~50°C再倒平板。一般培养基在受热、吸潮后,易被细菌污染或分解变质,因此一般培养基必须防潮、避光、阴凉处保存。
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培养基配置原则:选择适宜的营养物质,总体而言,所有微生物生长繁殖均需要培养基含有碳源、氮源、无机盐、生长因子、水及能源,但由于微生物营养类型复杂,不同微生物对营养物质的需求是不一样的,因此首先要根据不同微生物的营养需求配制针对性强的培养基。自养型微生物能从简单的无机物合成自身需要的糖类、脂类、蛋白质、核酸、维生素等复杂的有机物,因此培养自养型微生物的培养基完全可以(或应该)由简单的无机物组成。在该培养基配制过程中并未专门加入其他碳源物质,而是依靠空气中和溶于水中的CO2为氧化硫硫杆菌提供碳源。就微生物主要类型而言,有细菌、放线菌、酵母菌、霉菌、原生动物、藻类及病毒之分,培养它们所需的培养基各不相同。在实验室中常用牛肉膏蛋白胨培养基(或简称普通肉汤培养基)培养细菌,用高氏I号合成培养基培养放线菌,培养酵母菌一般用麦芽汁培养基,培养霉菌则一般用查氏合成培养基。在配制用于观察和定量测定微生物生长状况的合成培养基时,常需在培养基中加入少量螯合剂。黑龙江培养基灭菌 培养基制备器
有的培养基还含有素和色素,用于单种微生物培养和鉴定。中国澳门大容量 培养基制备器
培养基的实验室制备:①概述:培养基和试剂的灭菌通常采用湿热灭菌或过滤灭菌。有些培养基无需高压灭菌,可煮灭菌。如,含亮绿的肠道菌培养基对光和热特别敏感,应在煮沸后快速冷却,避光保存。同样,一些试剂则不需要灭菌,直接使用(参见相关标准或生产厂商的使用说明)。②湿热灭菌;p湿热灭菌在高压锅或培养基制备器中进行。高压霉菌一般采用121℃±3℃霉菌15min。如果培养基的体积超过1000mL,要对灭菌条件进行适当的调整。所有操作均要按照标准和使用说明的规定进行。注:大容量培养基(>1000mL)灭菌时可能会造成过度加热。加热后应采取适当的方式冷却,防止沸溢。这对大容量培养基和敏感性培养基(如含亮绿的培养基)是非常重要的。中国澳门大容量 培养基制备器
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