实验室及中试放大规模蛋白纯化系统 Unique Autopure系列蛋白纯化系统 主要应用领域 : – 蛋白纯化系统主要应用于单抗、重组蛋白,样品前处理智能蛋白纯化系统上门安装、疫苗、生化 药、、天然产物和多糖等生物制药领域。用于生物制品的下游工艺的分离纯化。 Unique AutoPure 系列蛋白纯化系统 : 产品特点及优势: – 模块化设计,提供多个配置,满足特殊工艺流程需求 - 低脉动高精度双柱塞输液泵 ,样品前处理智能蛋白纯化系统上门安装,保证优异的分离重现性 ; – 全系统与液体接触的地方均由生物兼容性材料组成、符合FDA、USP VI等相关法规要求 ; – DAD全谱直读检测器,避免了传统的机械切换式检测器所带来的不稳定性及高故障率 ; – 固定波长检测器灯为长寿命LED灯,寿命大于8000小时,降低维护成本 ; – **技术紫外检测器流通池,低死体积、低峰拓展,提高了色谱分离度 ; – 高灵敏度在线pH、电导率、紫外检测器,低死体积、低峰拓展,提高了色谱分离度 ; – 集中了buffer选择阀,自动进样阀、柱位阀等自动化组件,提高了纯化的自动化程度 ; – 具有柱前、柱后,样品前处理智能蛋白纯化系统上门安装、压差报警,气泡传感器检测等功能,极大的保护了系统及层析柱的安全性 ; – 层析工作站软件是一款功能强大、性能先进、高稳定性的色谱数据管理系
蛋白质分离纯化步骤(二) 2.4.2 纤维素柱层析法 该法是利用蛋白质的酸碱性质作为分离的基础。离子交换纤维素(cellulose ion-exchanger)是人工合成的纤维素衍生物,它具有松散的亲水性网状结构,有较大的表面积,使蛋白质大分子可以自由通过。因此常用于蛋白质的分离。 (1)羧甲基纤维素(CM-纤维素) 在纤维素颗粒上带有羧甲基基团。在中性pH条件下,羧甲基上的质子可解离下来(图2-27a),而溶液中带正电荷的蛋白质分子可与纤维素颗粒上的羧甲基负电荷结合。可交换的基团带正电,因此是一种阳离子交换剂。蛋白质与离子交换纤维素之间结合能力的大小取决于彼此间相反电荷基团之间静电吸引。 (2)二乙氨基乙基纤维素(DEAE-纤维素) 在中性pH条件下,它含有带正电荷的基团,可与溶液中的带负电荷的蛋白质结合,可交换的基团带负电荷,因此是一种阴离子交换剂。当某一蛋白质混合溶液通过装有DEAE-纤维素的层析柱时,带正电荷的蛋白质不能结合而随着洗脱液的流动先被洗脱下来。带负电荷的蛋白质将被结合到柱上。结合力取决于彼此相反电荷基团间的静电吸引。然后选用一定pH和离子强度的缓冲液进行洗脱,改变蛋白质分子所带的静电荷,依次从层析柱流出达到相互分离的目的。
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