饲料中维生素D3的测定
1 仪器及试剂
仪 器:
1). 分析天平一台(精度0.1mg);
2). 超声波清洗机一台;
3). 溶剂过滤器(含泵)一套;
4). 微量进样器(100µl)一支;
5). 等度高效液相色谱仪;
试 剂:
1).实验室用水;
2). 甲醇,色谱纯;
3). 维生素D3标准品:含量≥99%;
4). 维生素D3标准贮备液;
5). 维生素D3标准工作液;
2 样品制备
称取饲料样品1g,精确至0.0001g,置于100ml的棕色容量瓶中,加入约80ml的甲醇,瓶塞不要拧紧,于65℃超声波水浴中超声提取30min,冷却至室温,用甲醇稀释至刻度,充分摇匀。则将溶液过0.45µm滤膜过滤,进样测定。使维生素D3的进样浓度与标准工作液浓度接近。
3 色谱条件
色谱柱: C18色谱柱 150mm×4.6mm×5μm;
流动相:甲醇+水(98+2);
流速:1.0mlmin;
温度:室温;
进样量:20μl
检测波长:264nm。
4 色谱图
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