超微量分光光度计在核酸定量和分析中的应用:
分光光度测定法是一项定量和分析生物成分的成熟技术。其中,核酸是生物实验室**常检测的生物成分之一。确定这些样品的浓度和纯度对许多下游实验至关重要。
核酸主要吸收260nm下的紫外光,四川双检测模式超微量分光光度计样品检测,其浓度可以应用朗伯比尔定律通过它们的相关消光系数和样品光程计算出来。
首先,260nm的紫外光直接照射样品,并且穿过样品,而另一边的光电检测器则测定有多少光被吸收。通过对照参比(一般是样品稀释液),四川双检测模式超微量分光光度计样品检测,四川双检测模式超微量分光光度计样品检测,可以定量样品中的核酸浓度。
当一束单色光(指路由一种颜色的光)通过一均匀的溶液时,一部分被吸收,一部分透过。四川双检测模式超微量分光光度计样品检测
包括波长范围为400~760 nm的可见光区和波长范围为200~400 nm的紫外光区。不同的光源都有其特有的发射光谱,因此可采用不同的发光体作为仪器的光源。
钨灯的发射光谱:钨灯光源所发出的400~760nm波长的光谱光通过三棱镜折射后,可得到由红橙,黄绿,蓝靛,紫组成的连续色谱;该色谱可作为可见光分光光度计的光源。
氢灯(或氘灯)的发射光谱:氢灯能发出185~400 nm波长的光谱可作为紫外光光度计的光源。
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浙江超微量超微量分光光度计蛋白检测蛋白质在280nm波长处有较大吸光值。
宝予德超微量分光光度计使用时注意小贴士:
(1)测量前将样品中度混匀(可采用震荡器或用手指弹震管底)
(2)移液器吸头插入液面下吸取样品,可避免吸入气泡;TIP头贴着下光纤表面打出样品,且只按到移液器***挡尽头,第二挡不要按,可以避免吹出气泡到样品中。
(3)每次测量完毕后,用蒸馏水清洁上下光纤端面,这样可以更好地保证下一次测量的准确性(主要针对超高浓度样品,一般样品无此要求)。
(4)每次做空白检测前一定要先用水清洁上下光纤表面,可保证空白检测准确。
(5)每次测量的核酸样品量建议为1-2微升,蛋白样品建议2微升。 过少可能无法形成水柱,过多可能溢出。
(6)加样后尽快测量,以防蒸发浓缩以及灰尘落入,已加样品不能多次检测,如需重测需重新滴加同一样品。
(7)仪器避免阳光直射,避免强风吹拂,以避免蒸发。
(8)连续测量一段时间后擦净样品,用水清洁上下光纤表面,然后用水或缓冲液进行重新空白后再检测。
(9)清洁光纤端面(上样基座)时必须用洁净质软的实验室用纸(擦镜纸等)进行轻轻擦拭。
Micro Drop可以检测45-48mm的10mm光程的比色皿。当使用微量,半微量或者超微量的比色皿时,我们建议使用周边不透明的比色皿,不透明的比色皿保证了光穿过样本后全部到达检测器。而透明的比色皿会让那些没有透过样本的光也到达检测器,这样会导致样品(特别是低浓度样品)的检测不准确。
当检测的波长为紫外区域时(<340nm),要使用石英比色皿,这样才能透过紫外光。虽然有一些制造商提供紫外透过的一次性塑料比色皿,但是即使质量比较好的塑料比色皿也不能让低于220nm以下波长的紫外光透过,而大部分玻璃和塑料比色皿是完全紫外非透过性的。
一般单光束的分光光度计都会推荐相配的比色皿,而许多比色皿生产厂家都有严格的质控来保证比色皿的性能而不用在换比色皿时需要校准,这些比色皿都可以用在本产品上。
消光系数是被测溶液对光的吸收大小值。
超微量分光光度计检测蛋白A280:
蛋白和核酸不一样,具有很强的多样性。Protein A280功能应用于检测那些含有Trp、Tyr残基或者含有Cys-Cys二硫键的纯蛋白,这些蛋白在280nm吸光度明显。Protein A280功能不需要构建标准曲线,而是检测吸光度后,直接计算蛋白浓度。
Protein A280显示紫外吸收光谱,检测280nm处的吸光度后计算浓度(mg/ml)。和核酸检测一样,Protein A280记录显示的是10mm光程下的数据。
上海宝予德科学仪器有限公司欢迎大家来电咨询!测试只在可见光区有吸收的样品时使用玻璃比色皿。四川双检测模式超微量分光光度计样品检测
双光束分光光度计 以两束光一束通过样品、另一束通过参考溶液的方式来分析样品的分光光度计。四川双检测模式超微量分光光度计样品检测
测试在紫外区有吸收的样品时用石英比色皿,测试只在可见光区有吸收的样品时使用玻璃比色皿。石英比色皿在可见和紫外光区没有吸收,而玻璃比色皿在紫外区有吸收,所以不能用于紫外光区。对于一般的非光学专业人员,用眼睛是不能分开的两种比色皿的。但是两者硬度差别很大很大。石英比色皿比玻璃比色皿硬度大(***值)几十倍,如果把两个对磨,石英比色皿将很少被磨损,而玻璃比色皿磨损非常大。由于石英比色皿的透光范围从0.12-4.5微米,***的谱段范围内没有任何吸收峰。而玻璃比色皿只有0.4-4微米,且有许多离子吸收峰。所以,石英比色皿要比玻璃比色皿优越的多,化验数据更准确、更可靠。
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上海宝予德科学仪器有限公司致力于医药健康,以科技创新实现高质量管理的追求。宝予德拥有一支经验丰富、技术创新的专业研发团队,以高度的专注和执着为客户提供移液器,吸头,酶标仪,分光光度计。宝予德继续坚定不移地走高质量发展道路,既要实现基本面稳定增长,又要聚焦关键领域,实现转型再突破。宝予德始终关注医药健康行业。满足市场需求,提高产品价值,是我们前行的力量。
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