超微量分光光度计在核酸定量和分析中的应用:
分光光度测定法是一项定量和分析生物成分的成熟技术。其中,核酸是生物实验室**常检测的生物成分之一。确定这些样品的浓度和纯度对许多下游实验至关重要。
核酸主要吸收260nm下的紫外光,河南双检测模式超微量分光光度计紫外检测,其浓度可以应用朗伯比尔定律通过它们的相关消光系数和样品光程计算出来,河南双检测模式超微量分光光度计紫外检测。
首先,260nm的紫外光直接照射样品,河南双检测模式超微量分光光度计紫外检测,并且穿过样品,而另一边的光电检测器则测定有多少光被吸收。通过对照参比(一般是样品稀释液),可以定量样品中的核酸浓度。
Micro Drop超微量每次测量完毕后,用蒸馏水清洁上下光纤端面。河南双检测模式超微量分光光度计紫外检测
使用Micro Drop可以方便地使用微量样品进行紫外-可见分光检测:
1. 不用稀释就可以检测浓度小于15000ng/μl(dsDNA)的核酸浓度;
2. 普通的紫外-可见分光光度检测;
3. 纯蛋白浓度检测(A280);
4. 微阵列和Protein & Labels应用中的荧光染料基团检测;
5. BCA蛋白定量分析;
6. Bradford蛋白定量分析;
7. Lowry法蛋白定量分析;
8. Pierce 660nm蛋白定量分析;
9. 微生物细胞培养检测。
上海宝予德科学仪器有限公司主营超微量分光光度计,欢迎大家来电咨询!
浙江全光谱波长超微量分光光度计紫外检测MicroDrop可连接电脑/平板电脑,实现本地一指控制;WiFi无线连接功能,节省时间和空间。
分光光度计是一类很重要的分析仪器 ,无论在物理学、化学、生物学、医学、材料学、环境科学等科学研究领域 ,还是在化工、医药、环境检测、冶金等现***产与管理部门 ,紫外可见分光光度计督有***而重要的应用。分光光度计就是利用分光光度法对物质进行定量定性分析的仪器,常用于核酸,蛋白定量以及细菌生长浓度的定量。
由于核酸,蛋白定量以及细菌生长浓度的定量样本量很小,于是超微量分光光度计应运而生。超微量分光光度计近年来已经替换普通的分光光度计成为分子生物学实验室的新宠,广泛应用于生命科学实验室蛋白质组学和基因组学等领域。
超微量分光光度计已成为现代分子生物实验室常规仪器。常用于核酸,蛋白定量以及细菌生长浓度的定量。
超微量分光光度计不仅涵盖了可见光分光光度计的功能而且也可以进行紫外分光光度计的应用:
(二)UV-VIS常规可见-紫外检测:
全波长超微量分光光度计可以像普通的紫外-可见分光光度计一样行使功能。如BIO-DL MicroDrop可以显示从185到910nm的光波下样品的吸光值。**多可以同时指定检测40个波长下的吸光值并把数据显示在报告中。
(三)蛋白质的直接定量(UV法):
这种方法是在280nm波长,直接测试蛋白。蛋白质测定过程非常简单,先测试空白液,然后直接测试蛋白质。蛋白质直接定量方法,适合测试较纯净、成分相对单一的蛋白质。紫外直接定量法相对于比色法来说,速度快,操作简单;但是容易受到平行物质的干扰,如DNA的干扰;另外敏感度低,要求蛋白的浓度较高。
A260/A280:是核酸纯度的指示值。
分光光度计,又称光谱仪(spectrometer),是将成分复杂的光,分解为光谱线的科学仪器。测量范围一般包括波长范围为380~780 nm的可见光区和波长范围为200~380 nm的紫外光区。不同的光源都有其特有的发射光谱,因此可采用不同的发光体作为仪器的光源。钨灯的发射光谱:钨灯光源所发出的380~780nm波长的光谱光通过三棱镜折射后,可得到由红、橙、黄、绿、蓝、靛、紫组成的连续色谱;该色谱可作为可见光分光光度计的光源。上海宝予德科学仪器有限公司欢迎来电咨询!Micro Drop超微量采用新一代的2048线性CCD检测单元,拥有更高的灵敏度和精确度。河南双检测模式超微量分光光度计紫外检测
核酸的定量是超微量分光光度计使用频率较高的功能。河南双检测模式超微量分光光度计紫外检测
超微量分光光度计比色法测定蛋白质浓度:
BCA法:这是一种较新的、更敏感的蛋白测试法。要分析的蛋白在碱性溶液里与Cu2+反应产生Cu+,后者与BCA形成螯合物,形成紫色化合物,吸收峰在562nm波长。此化合物与蛋白浓度的线性关系极强,反应后形成的化合物非常稳定。相对于Lowry法,操作简单,敏感度高。但是与Lowry法相似的是容易受到蛋白质之间以及去污剂的干扰。
Bradford法:这种方法的原理是蛋白质与考马斯亮兰结合反应,产生的有色化合物吸收峰595nm。其比较大的特点是,敏感度好,是Lowry和BCA两种测试方法的2倍;操作更简单,速度更快;只需要一种反应试剂;化合物可以稳定1小时,方便结果;而且与一系列干扰Lowry,BCA反应的还原剂(如DTT,巯基乙醇)相容。但是对于去污剂依然是敏感的。**主要的缺点是不同的标准品会导致同一样品的结果差异较大,无可比性。
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