Micro Drop可以检测45-48mm的10mm光程的比色皿。当使用微量,半微量或者超微量的比色皿时,我们建议使用周边不透明的比色皿,不透明的比色皿保证了光穿过样本后全部到达检测器。而透明的比色皿会让那些没有透过样本的光也到达检测器,这样会导致样品(特别是低浓度样品)的检测不准确。
当检测的波长为紫外区域时(<340nm),要使用石英比色皿,这样才能透过紫外光,江苏操作简便超微量分光光度计试用,江苏操作简便超微量分光光度计试用。虽然有一些制造商提供紫外透过的一次性塑料比色皿,江苏操作简便超微量分光光度计试用,但是即使质量比较好的塑料比色皿也不能让低于220nm以下波长的紫外光透过,而大部分玻璃和塑料比色皿是完全紫外非透过性的。
一般单光束的分光光度计都会推荐相配的比色皿,而许多比色皿生产厂家都有严格的质控来保证比色皿的性能而不用在换比色皿时需要校准,这些比色皿都可以用在本产品上。
Micro Drop可以检测45-48mm的10mm光程的比色皿。江苏操作简便超微量分光光度计试用
分光光度法是在特定波长处或一定波长范围内光的吸收度,对该物质进行定性或定量分析。常用的波长范围为:(1)200~380nm的紫外光区,(2)380~780nm的可见光区,(3)2.5~25μm(按波数计为4000cm<-1>~400cm<-1>)的红外光区。所用仪器为紫外分光光度计、可见光分光光度计(或比色计)、红外分光光度计或原子吸收分光光度计。为保证测量的精密度和准确度,所有仪器应按照国家计量检定规程或本附录规定,定期进行校正检定。天津高灵敏度超微量分光光度计探针检测核酸的定量是超微量分光光度计使用频率较高的功能。
Micro Drop蛋白质检测功能:
Protein Bradford检测方式:
Bradford是常用的蛋白定量检测的方法。它通常用于浓度比较低的蛋白的浓度检测。与其他比色法一样,Bradford法检测蛋白浓度时必须构建一个标准曲线。
Bradford法是根据蛋白质在酸性溶液中,能够使考马斯亮蓝结合,使得染料的比较大吸收峰值变更为595nm来检测蛋白浓度。检测蛋白-染料复合物在595nm处的吸光值,并在750nm处做基线校正,计算得出蛋白的浓度。
常规检测使用试剂/蛋白样品的体积比为50:1,检测浓度范围为0.10mg/ml到8.0mg/ml(BSA),比较好线性浓度范围在0.01-1mg/ml。当使用基座检测时,推荐使用4μl样品和200μl Bradford试剂。
微量检测使用试剂/样品的体积比为1:1,可以检测蛋白浓度范围从15ug/ml至125ug/ml。要准备足够的样品来做基座检测,建议使用10μl样品和10μlBCA试剂(使用PCR管)。
按照试剂盒生产厂家的说明来准备标准品和和构建标准曲线。确保在所有检测过程中,每个样品的处理时间及环境温度一致。
Micro Drop比色皿检测基本操作:
1. 准备好两个比色皿,一个加入空白检测液,一个加入样品,保证加入的液体量足够,能盖过光束,光束(2mm宽)位置在比色皿底部以上8.5mm的位置,请按照比色皿生产厂家的建议加入液体。
2. 抬起样品臂,把比色皿插入到仪器中,插入比色皿时要注意透光面,与仪器上面的光路指向的方向相对应。
3. 在做比色皿检测时样品臂必须放下来。
4. 在Micro Drop软件上的“选项”框中选择“使用比色皿”, 插入比色皿,勾选基线校正,设置相应参数进行空白检测及检测。
5. 当检测完成后,移出比色皿,倒出样品,清洗干净比色皿。
Micro Drop为一款全波长(185~910nm)超微量紫外可见分光光度计。
超微量分光光度计与传统分光光度计相比,前者具备的独特优点在于(二):
(4)氙气闪光灯为灯源,代替了氘灯(紫外)和钨灯(可见),使用寿命更长;
(5)不需要预热,可随时检测,检测时间短【BIO-DL MicroDrop<5秒】;
(6)显示吸光度值的同时,程序直接给出浓度值(核酸、蛋白和荧光染料);
(7)占据实验室空间体积比传统分光光度计小很多【BIO-DL MicroDrop重量:2.1kg】。
上海宝予德科学仪器有限公司主营超微量分光光度计,欢迎大家来电咨询!
测试在紫外区有吸收的样品时用石英比色皿。天津高灵敏度超微量分光光度计探针检测
A260/A280:是核酸纯度的指示值。江苏操作简便超微量分光光度计试用
超微量分光光度计的应用:
(一)核酸的定量:
核酸的定量是超微量分光光度计使用频率比较高的功能。可以定量溶于缓冲液的寡核苷酸,单链DNA、双链DNA,以及RNA。核酸的比较高吸收峰的吸收波长260nm。每种核酸的分子构成不一,因此其换算系数不同。定量不同类型的核酸,事先要选择对应消光因子。如:1OD的吸光值分别相当于50μg/ml的dsDNA,37μg/ml的ssDNA,40μg/ml的RNA,30μg/ml的Olig。测试后的吸光值经过上述系数的换算,从而得出相应的样品浓度。除了核酸浓度,分光光度计显示几个非常重要的比值表示样品的纯度,如A260/A280的比值,用于评估样品的纯度,因为蛋白的吸收峰是280nm。纯净的样品,比值大于1.8(DNA)或者2.0(RNA)。如果比值低于1.8或者2.0,表示存在蛋白质或者酚类物质的影响。A230表示样品中存在一些污染物,如碳水化合物,多肽,苯酚等,较纯净的核酸A260/A230的比值大于2.0。
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