[VIP第1年] 指数:3
紫外可见分光光度计等光谱分析仪器的主要性能指标：检出限在误差分布遵从正态分布的条件下，由统计的观点出发，可以对检出限作如下的定义：检出限是指能以适当的置信概率被检出的组分的小量或小浓度。它是由小检測信号值导出的。检出限与灵敏度是密切相关的两个量，灵敏度越高，检出限值越低。但两者的义是不同的。灵敏度指的是分析信号随组分含量变化的大小，空气紫外可见分光光度计，因此，空气紫外可见分光光度计，它同检测器放大倍数有直接的依赖关系，而检出限是指分析方法可能检出的比较低量或比较低浓，是与测定噪声直接相联系的，而且具有明确的统计意义。从检出限的定义可以知道，提高测定精密度、降低噪声，可以改善检出限。校正曲线的线性范围线性范围是指从定量测定的比较低浓度扩展到校正曲保持线性浓度的范围。不同仪器线性范围差异较大，如在原子吸收光谱法一般*1-2两个数量级，而电感耦合等离子体原子发射光谱法可达5-6个数量级，空气紫外可见分光光度计。分辨率分辨率是指光谱分析仪器对两相邻谱线分辨的能力。仪器分辨率越高，表明该仪器能很好地将两相邻谱线分离而没有重叠。仪器分辨率主要取决于器的分光系统和检测器等。选择性仪器的选择性是指该仪器不受试样基体中所含其它类物质干扰的程度。然而。 光源必须具有足够的输出功率和稳定性。空气紫外可见分光光度计
分光光度计的带宽（bandwidth）很大程度上依赖于单色仪的狭缝的宽度。可以投射出实验精确要求的光谱。一种严格带宽使得仪器能对复杂的混合物进行高分辨率的吸光测量。可变的单色仪的狭缝宽度能使一台分光光度计满足多种实验需要。为了测量吸光值，分光光度计制造商通常使用光电倍增管（photo-multipliertubes，PMTs）和光敏二极管。PMTs提供快速的反应时间和良好的灵敏度，并且可以在紫外光谱调节至特定的范围。但一些制造商依赖于光敏二极管的动态范围在数秒内行使所有的光谱测量。分析紫外可见分光光度计报价测定时，禁止将试剂或液体物质放在仪器的表面上，如有溶液溢出或其它原因将样品弄脏，要及时清理干净。
吸收池装液前必须用待装溶液润洗2～3遍，润洗前是否要用纯水先润洗一遍呢?这可看具体情况区别对待。如果初次用干的吸收池装待测液(特别是有色溶液)时，从维护保养吸收池的角度讲，为减小其干玻面对颜色的吸附能力，便于用后吸收池的清洗，建议先用纯水润洗一遍，再用待装溶液润洗2～3遍；若后再用此吸收池装浓度相近或更高浓度的溶液(如从小到大测定标准系列溶液的吸光度)时，可直接用待装溶液润洗2～3遍即可。标准曲线法定量时，如果是先测定标准系列溶液的吸光度，当测到样品溶液时，由于测定的样品溶液浓度比***一个标准溶液的浓度低或不可知时，建议先用纯水润洗一遍，再用待装溶液润洗2～3遍。
分光光度计的简单原理：分光光度计采用一个可以产生多个波长的光源，通过系列分光装置，从而产生特定波长的光源，光源透过测试的样品后，部分光源被吸收，计算样品的吸光值，从而转化成样品的浓度。样品的吸光值与样品的浓度成正比。核酸的定量：核酸的定量是分光光度计使用频率比较高的功能。可以定量溶于缓冲液的寡核苷酸，单链、双链DNA，以及RNA。核酸的比较高吸收峰的吸收波长260nm。每种核酸的分子构成不一，因此其换算系数不同。定量不同类型的核酸，事先要选择对应的系数。如：1OD的吸光值分别相当于50μg/ml的dsDNA，37μg/ml的ssDNA，40μg/ml的RNA，30μg/ml的Olig。测试后的吸光值经过上述系数的换算，从而得出相应的样品浓度。测试前，选择正确的程序，输入原液和稀释液的体积，尔后测试空白液和样品液。然而，实验并非一帆风顺。读数不稳定可能是实验者的问题。灵敏度越高的仪器，表现出的吸光值漂移越大。 仪器的选择性是指该仪器不受试样基体中所含其它类物质干扰的程度。
紫外可见分光光度计在有机分析中的应用分析。利用特征吸收峰法鉴别有关物质利用某些化合物在紫外区的特征吸收峰，可以判别物质。如，氯霉素分子中的硝基是由它的紫外光谱确定的。在紫外区的298nm和278nm处，氯霉素会出现芳香硝基的特征吸收峰。五元环酮和羧基酯的红外光谱特征吸收峰都在1740cm-1附近，因此，用红外光谱法，难以区分它们。但是，在紫外光谱中，只有五元环酮在210nm以上有吸收，因此，可以鉴别。(2)利用紫外光谱谱图的方法鉴别有机化合物通过对比两个有机化合物的紫外光谱图，可以鉴别它们。(3)利用π键反应减小干扰在紫外可见分光光度计的使用过程中，有时很强的吸收会引起干扰作用，如：有些稠环化合物对某些波长的吸收就很强，这时，可采用化学，c键反应去除。例如有机化合物蒽具有三个大冗键，在波长252nm处有沟吸收，它的摩尔吸光系数会对一些在此也有吸收的化合物产生干扰，可让它与丁烯二酸酐发生Diels-Alder加成反应。这个反应的结果，原来三个大π键的共轭系统就被破坏，原先很强的吸收就被减弱，干扰就会减小。 紫外可见分光光度计的注意事项:测定时应保持比色皿清洁，池壁上液滴应用擦镜纸擦干，切勿用手捏透光面。专业紫外可见分光光度计报价
从专业角度情况看紫外可见分光光度计就是一种测定波长的相关设备。空气紫外可见分光光度计
狭缝的大小会影响到仪器的信噪比和标准曲线的线性范围。狭缝过大，通常会使线性范围变小，特别是当不在比较大吸收波长位置测定时更是如此。狭缝过小，信噪比变差，基线平直度和测量数据的重复性会变差。此外，还需要考虑样品吸收峰宽度的影响。通常单波长测定时，一般选择在比较大吸收波长位置，线性范围容易满足，可选择较宽的狭缝（1~2nm）多波长测定时，很难同时在所有波长都满足线性范围要求，应选择比较小的狭缝。对吸光度不是很大的样品，或者狭缝不是很小，这是检测器检测的光信号的强度是比较大的，重复性较好，可选择较少的重复次数。相反，如果样品吸光度很大，狭缝很小，选择较大的重复次数可获得更好的结果。空气紫外可见分光光度计
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